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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>RNA/DNA提取>>克隆及表達(dá)產(chǎn)品>> * G 鉀鹽溶液 ,200mg/mL1 Mu*

* G 鉀鹽溶液 ,200mg/mL1 Mu*

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更新時間:2017-07-18 14:07:26瀏覽次數(shù):263次

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* G 鉀鹽溶液 ,200mg/mL1 Mu*是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。

* G 鉀鹽溶液 ,200mg/mL1 Mu*規(guī)格及成分:

* G 鉀鹽溶液 ,200mg/mL1 Mu*產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg DH10Bac 細(xì)胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個 mini-F 復(fù)制子、*抗性基因、att Tn7 位點(diǎn)和 lac Zα-互補(bǔ)因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點(diǎn)所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1pFastBacDual 等)含有 Tn7R Tn7L 同源重組臂,Tn7R Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲病毒多角體基因啟動子、多克隆位點(diǎn)和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號。當(dāng)含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細(xì)胞后,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞 Sf9 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲病毒。此外,DH10Bac 細(xì)胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實(shí)現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍(lán)白斑篩選。
* G 鉀鹽溶液 ,200mg/mL1 Mu*詳細(xì)說明書:

* G 鉀鹽溶液 ,200mg/mL1 Mu*使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin7 μ g/mL gentamicin10 μg/mL tetracycline100 μg/mL X-gal40 μg/mL IPTG
2. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
3. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個離心管中加入 900 μL 無菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37 搖床, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時。
6. SOC 培養(yǎng)基進(jìn)行 10 倍梯度稀釋,如分成 3 個稀釋梯度 10-1,10-2,10-3
7. 100 μL 的各個梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37培養(yǎng) 24-48 小時。 8. 保留剩余的菌液保存于 4,視平板上菌落生長情況決定去留。
TNFRSF9重組人 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

窖蛋白(CAV1)重組蛋白 Recombinant Caveolin 1 (CAV1)

FAIM3重組人 FAIM3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

LCN1 Protein Human 重組人 LCN1 / VEGP / Lipocalin-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HA Protein H5N8 重組甲型流感 H5N8 (A/turkey/Ireland/1378/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

髓鞘型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP8)重組蛋白 Recombinant Fatty Acid Binding Protein 8, Myelin (FABP8)

IL6R重組人 IL6R / CD126 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

VTN重組人 VTN / Vitronectin 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

REG3A Protein Human 重組人 REG3A / HIP 蛋白 (His 標(biāo)簽)
窖蛋白(CAV1)重組蛋白 Recombinant Caveolin 1 (CAV1)

LCN1 Protein Human 重組人 LCN1 / VEGP / Lipocalin-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TNFRSF9重組人 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H5N8 重組甲型流感 H5N8 (A/turkey/Ireland/1378/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

FAIM3重組人 FAIM3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
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人狀瘤病毒抗體(HPV)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人瘤病毒58HPV-58ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人瘤病毒18HPV-18ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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