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更新時間:2017-09-06 10:01:06瀏覽次數(shù):206次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMYB培養(yǎng)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0901圖片
細胞名稱 人正常前列腺上皮細胞;RWPE-1品牌
形態(tài)特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 腫瘤抑制基因: p53 + [PubMed: 9214605] pRB + [PubMed: 9214605] 一位正常男性前列腺組織切片的周圍區(qū)域的上皮細胞用單拷貝的人瘤病毒的18(HPV-18)進行轉(zhuǎn)化,建立了RWPE-1 (ATCC CRL-11609) 細胞株 [PubMed: 9214605]. 在三維Matrigel培養(yǎng)時,在雄激素作用下,RWPE-1細胞形成腺胞并向培養(yǎng)基中分泌PSA。[PubMed: 11170142]. 當與Matrigel或基質(zhì)細胞混合注射雄性裸鼠時,RWPE
培養(yǎng)條件 這株細胞的基本培養(yǎng)基作為Invitrogen (GIBCO)提供的kit的部分: 角化細胞無血清培養(yǎng)基K-SFM,kit目錄號17005-042。隨kit提供這株細胞生長所需的兩種添加劑(牛垂體提取物BPE及人重組表皮生長因子EGF)。 配制*生長培養(yǎng)基,需添加以下成分: 0.05 mg/ml BPE – 隨K-SFM提供 5 ng/ml EGF -隨K-SFM提供。
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(52+5)
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人正常前列腺上皮細胞;RWPE-1品牌質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人正常前列腺上皮細胞;RWPE-1品牌細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
人正常前列腺上皮細胞;RWPE-1品牌培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實現(xiàn)為科學研究提供實驗細胞技術(shù)服務。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關(guān)信息進行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風險和責任,采取適當?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。
MS4A1 Others Human 人 CD20 / MS4A1 (aa 213-297) 人細胞裂解液 (陽性對照)
6-10B, 人鼻咽癌細胞系
大鼠表皮黑色素細胞*培養(yǎng)基 100mL
LLC-MK2恒河猴腎細胞 Ganges RIver LLC-MK2 monkey kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
IFNA4 Protein Human 重組人 IFNα4 / IFNa4 / Interferon alpha-4 蛋白 (His 標簽)
MDA-MB-175VII(人導管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 BRL 3A(大鼠肝細胞)
EL4 小鼠淋巴瘤細胞
膀胱上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人神經(jīng)細胞(HN) (10×106 )
人上皮細胞;Ca Ski 大鼠腸巨噬細胞*培養(yǎng)基 100mL
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-3E5
IFNL1 Others Human 人 IL-29 / Interleukin-29 人細胞裂解液 (陽性對照)
6-10B, 人鼻咽癌細胞系
MS4A1 Others Human 人 CD20 / MS4A1 (aa 213-297) 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠表皮黑色素細胞*培養(yǎng)基 100mL
LLC-MK2恒河猴腎細胞 Ganges RIver LLC-MK2 monkey kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
IFNA4 Protein Human 重組人 IFNα4 / IFNa4 / Interferon alpha-4 蛋白 (His 標簽)
MDA-MB-175VII(人導管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 BRL 3A(大鼠肝細胞)
phospho-FAK(pSer732)(phospho-Focal adhesion kinase) 磷酸化粘著斑激酶抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
細胞死亡調(diào)解子抗體 Anti-Bim 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-ECT2 (Thr790) 磷酸化上皮細胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml
暗室燈 個
ZNF148 英文名稱: 鋅指蛋白148抗體 0.2ml
DAPL1 英文名稱: 凋亡相關(guān)蛋白激酶樣蛋白1抗體 0.2ml
細胞死亡調(diào)解子抗體 Anti-Bim 0.1ml
EpCAM(Epithelial cell adhesion molecule) 上皮細胞粘附分子/表皮細胞粘附分子(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
ATP合成酶H+轉(zhuǎn)運線粒體F0復合體亞基F6抗體 Anti-ATP5j 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Tyr869) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml
雙抗 70ml Gibco
Zonula occludens protein 3 英文名稱: 緊密粘連蛋白ZO-3抗體 0.1ml
DOPA Decarboxylase 英文名稱: 多巴胺脫羧酶抗體 0.1ml
ATP合成酶H+轉(zhuǎn)運線粒體F0復合體亞基F6抗體 Anti-ATP5j 0.1ml
人正常前列腺上皮細胞;RWPE-1品牌ZBTB25 英文名稱: 鋅指蛋白46抗體 0.2ml
DAP1 英文名稱: 死亡相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
Artemin抗體 Anti-ART 0.1ml
Anti-CD8/PE 熒光素藻紅蛋白標記兔抗人、大、小鼠CD8抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-EIF4EBP1(Ser111) 磷酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
EGF(Epidermal growth factor)rat 重組表皮生長因子抗原(大鼠)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
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