Cas9穩定表達的人非小細胞肺腺癌細胞；NCI-H1975-Cas9-595品牌培養溫馨提示：
1）公司努力實現為科學研究提供實驗細胞技術服務。所提供的實驗細胞及其子代，不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2）公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于我們的技術條件，中心不保證其準確性。
3）從文獻等處引用的信息本中心未進行核實，僅供參考。
4）使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉讓及使用細胞的時候要遵守國內外有關的法律法規，充分考慮可能存在的風險和責任，采取適當的安全和處理措施盡量降低對健康或環境的危害。

細胞名稱  Cas9穩定表達的人非小細胞肺腺癌細胞；NCI-H1975-Cas9-595品牌
形態特性   上皮樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞是采用慢病毒感染的方式使NCI-H1975細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo，經400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養條件   RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法  1:3~1:6傳代；每周換液2~3次。　
傳代情況  C3
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養法（-）　
STR   Amelogenin：x,x；CSF1PO：12,12；D12S391：17,17；D13S317：10,13；D16S539：9,12；D18S51：13,13；D19S433：15,15.2；D21S11：28,28；D2S1338：17,17；D3S1358：14,15；D5S818：11,12；D6S1043：12,12；D7S820：8,8；D8S1179：13,13；FGA：21,24；Penta E：12,12；TH01：7,7；TPOX：8,11；vWA：18,18；
同工酶

染色體

使用權限 A類
Cas9穩定表達的人非小細胞肺腺癌細胞；NCI-H1975-Cas9-595品牌細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
KIR2DL4 Others Human 人 KIR2DL4 / CD158D CHO細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0106HFL1(人肺成纖維細胞)5×106cells/瓶×2

人表皮黑色素細胞-淺色素裂解物HELM-l L

新生牛眼晶體上皮細胞;NBLE 人甲狀腺癌細胞，SW579細胞 RIN-m5F細胞，小鼠β胰島素瘤細胞

人膀胱上皮永生化細胞;SV-HUC-1

EPHA4 Others Human 人 EPHA4 人細胞裂解液 (陽性對照)
人臍帶血單個核細胞 Human

T-110A透明質酸酶(含10mL酶解緩沖液)1mL

心肌細胞 (HCMa) (1×106 )

小鼠骨髓瘤細胞;Fox-NY 小鼠肺大靜脈平滑肌細胞*培養基 100mL

正常大鼠腎細胞;NRK

SLAMF8 Others Mouse 小鼠 SLAMF8 / BLAME 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠肉瘤瘤株;S180

人膠質細胞(少突細胞)(HO) (1×106 )

原代表皮角化細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml

人巨細胞白血病細胞株;Mo7e 大鼠卵巢上皮細胞*培養基 100mL

H22 小鼠肝癌細胞

ERBB2 Others Rat 大鼠 ErbB2 / HER2 人細胞裂解液 (陽性對照)
D/E中和瓊脂250g用于衛生環境中微生物的分離培養

水稻赤霉菌培養基 250g 用于水稻中赤霉菌培養

改良V-P培養基 V-P Medium,Modified 250 用于蠟樣芽孢桿菌的V-P試驗(SN標準)

標準Ⅱ號營養瓊脂250g/瓶用于培養非苛氧的細菌，也用于奶制品中細菌總數的測定incubationmedia標準Ⅱ號營養瓊脂250g/瓶用于培養非苛氧的細菌，也用于奶制品中細菌總數的測定

伊紅美藍瓊脂平板(9cm) 10個/包 弱選擇性培養基、用于分離腸道致病菌，特別是大腸桿菌
MZACAgar

25L incubation media 25L

抗生鏈霉菌 產磷酸二脂酸 支/瓶

VTMBroth

ColumbiaBloodAgarMedium
Cas9穩定表達的人非小細胞肺腺癌細胞；NCI-H1975-Cas9-595品牌伊紅美藍瓊脂(EMB)22060250g用于分離革蘭氏陰性腸道菌特別是大腸菌群和糞大腸菌群

葡萄糖胰蛋白胨肉湯 (CM0073) Oxoid incubation media 葡萄糖胰蛋白胨肉湯 (CM0073) Oxoid

諾爾斯氏鏈霉菌 模式菌株 支/瓶

ModifiedMacConkeyBroth

大豆-干酪素消化物培養基 250g 用于*的MPN測定，增菌培養，氯濃度可根據需要而調整

Cas9穩定表達的人非小細胞肺腺癌細胞；NCI-H1975-Cas9-595品牌質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，進口來源，保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。