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細胞名稱 Cas9穩定表達的人非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H1975-Cas9-594培養
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使NCI-H1975細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo,經400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 1:3~1:6傳代;每周換液2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:12,12;D12S391:17,17;D13S317:10,13;D16S539:9,12;D18S51:13,13;D19S433:15,15.2;D21S11:28,28;D2S1338:17,17;D3S1358:14,15;D5S818:11,12;D6S1043:12,12;D7S820:8,8;D8S1179:13,13;FGA:21,24;Penta E:12,12;TH01:7,7;TPOX:8,11;vWA:18,18;
同工酶
染色體
使用權限 A類
Cas9穩定表達的人非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H1975-Cas9-594培養質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,進口來源,保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
Cas9穩定表達的人非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H1975-Cas9-594培養細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
Cas9穩定表達的人非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H1975-Cas9-594培養培養溫馨提示:
1)公司努力實現為科學研究提供實驗細胞技術服務。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于我們的技術條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉讓及使用細胞的時候要遵守國內外有關的法律法規,充分考慮可能存在的風險和責任,采取適當的安全和處理措施盡量降低對健康或環境的危害。
CD276 Others Rat 大鼠 B7-H3 / CD276 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0108HIC(人小腸癌細胞)5×106cells/瓶×2
人表皮黑色素細胞-深色素裂解物HELM-d L
Anglne細胞,人卵巢癌細胞系 大黃魚EPC細胞,EPC細胞 上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
Calu-6(人肺退行性癌細胞) 5×106cells/瓶×2
HPrSMC Pellet 人類前列腺平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人星形膠質細胞cDNAHA cDNA
HUVEC, 人臍靜脈內皮細胞 Human
T-106AIV型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
人心臟成纖維細胞( HCF) ( 5×105 )
小鼠胚胎成纖維細胞;MEF 小鼠肺大動脈平滑肌細胞*培養基 100mL
大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-1
VCAM1 Others Mouse 小鼠 VCAM1 / L1CAM / CD106 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH2
人脊髓星形膠質細胞(HA-sp)(1×106)
BxPC-3, 人原位胰腺腺癌細胞株
人類原巨核細胞型白血病細胞;UT-7 大鼠膀胱上皮細胞*培養基 100mL
LM-8 小鼠骨肉瘤
FLT4 Others Mouse 小鼠 FLT-4 / VEGFR3 人細胞裂解液 (陽性對照)
D/ENeutralizingAgar
FWA淡水魚類瓊脂培養基 250g 用于淡水魚類腸道內細菌檢測
改良Skirrow氏瓊脂基礎 Skirrow Agar Base,Modified 250 用于空腸彎曲菌的分離培養(SN 、GB標準)
m-TGE肉湯250g/瓶用于濾膜法測定奶制品中的菌落總數incubationmediam-TGE肉湯250g/瓶用于濾膜法測定奶制品中的菌落總數
Eosin-MethyleneBlueAgar
含0.2%可溶性淀粉的BCP脫脂奶粉平板計數培養基250g用于食品中嗜熱菌芽孢計數(SN標準)
25L incubation media 25L
克魯斯假絲酵母 模式菌株、生產D-乳酸 支/瓶
MEMmaintenanceoffluid
梭菌* 250g 用于梭菌的增菌培養和計數
Cas9穩定表達的人非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H1975-Cas9-594培養一級目錄:顯色培養基二級目錄:顯色培養基
Casein Hydrolysate(Acid)/酪蛋白水解物(酸解) 現貨 Oxoid 500g incubation media Casein Hydrolysate(Acid)/酪蛋白水解物(酸解) 現貨 Oxoid 500g
綠針假單胞菌 食用 支/瓶
Bufferpeptonewater(BPW)
AntibioticAgarNO.7
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