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Cas9穩定表達的人食管癌細胞;EC109-Cas9-572圖片質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,進口來源,保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
細胞名稱 Cas9穩定表達的人食管癌細胞;EC109-Cas9-572圖片
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使EC109細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo,經400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 1:3傳代;2~3天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:10,10;D12S391:19,20;D13S317:11,11;D16S539:12,12;D18S51:12,16;D19S433:13,13;D21S11:30,30;D2S1338:17,20;D3S1358:17,17;D5S818:12,12;D6S1043:13,13;D7S820:8,12;D8S1179:13,14;;FGA:25,25;Penta E:16,16;TH01:9,9;TPOX:8,8;vWA:16,17;
同工酶
染色體
使用權限 A類
Cas9穩定表達的人食管癌細胞;EC109-Cas9-572圖片細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
F10 Others Human 人 Coagulation Factor X / FX / F10 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0152MDA-MB-453(人癌細胞)5×106cells/瓶×2
人滑膜細胞裂解物HSL
NCI-H838[H838]細胞,人肺癌細胞 人肺腺癌細胞,A2細胞 腦靜脈血管內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
兔角膜后基質層成纖維細胞;RCBBF
HAVCR2 Others Human 人 TIMD3 / TIM3 / HAVCR2 人細胞裂解液 (陽性對照)
MSC, 小鼠雪旺細胞 Mouse
CM-R056大鼠腎實質細胞*培養基100mL
人卵巢上皮細胞(HOSEpiC) ( 5×105 )
倉鼠/小鼠雜交瘤細胞;145-2C11 小鼠腸靜脈內皮細胞*培養基 100mL
人肺癌細胞;A-427 [A427]
NEGR1 Others Mouse 小鼠 NEGR1 人細胞裂解液 (陽性對照)
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0901
人齒齦成纖維細胞 (HGF)( 5×105 )
CL-0399NCI-H295R(人腎上腺皮質腺癌細胞)5×106cells/瓶×2
人前列腺癌高轉移細胞株;PC-3M IE8 大鼠骨細胞*培養基 100mL
CBRH-7919 大鼠肝癌細胞
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
0.0每支添加于HB4086中
Combinednitrogen-fixingbacteriamedium
布氏肉湯 Brucella Broth 250 用于彎曲桿菌增菌肉湯和布氏瓊脂制備(SN標準)
細菌保存培養基250g/瓶用于菌種培養與保存,可制備菌種保存斜面(pH7.3)incubationmedia細菌保存培養基250g/瓶用于菌種培養與保存,可制備菌種保存斜面(pH7.3)
Baird-ParkerAgarBase
馬鈴薯葡萄糖水250g用于椰毒假單胞酵米面亞種和真菌的增菌培養
40%尿素水 5mL/支×10(g) incubation media 40%尿素水 5mL/支×10(g)
7% NaC1胰胨水發酵管 7% NaC1胰胨水發酵管 20支 BR
LM-250用于膜濾法單增李氏菌選擇性分離(NEOGEN標準)incubationmediaLM-250用于膜濾法單增李氏菌選擇性分離(NEOGEN標準)
馬尿酸鈉培養基 250g 用于彎曲桿菌的馬尿酸鈉水解試驗(GB標準)
Cas9穩定表達的人食管癌細胞;EC109-Cas9-572圖片厭氧培養液250g用于厭氧菌增菌培養
10%氯胰酪胨大豆肉湯 10% NaCl Tryptic Soy Broth 用于*的MPN測定,增菌培養(GB2008標準)
牛肉浸粉 Beef Extract Powder 250 培養基原材料,提供細菌生長所需的生長因子
強化梭菌瓊脂250g/瓶用于梭菌的分離培養incubationmedia強化梭菌瓊脂250g/瓶用于梭菌的分離培養
甲基紅指示劑盒 5ml*2 用于甲基紅試驗
Cas9穩定表達的人食管癌細胞;EC109-Cas9-572圖片培養溫馨提示:
1)公司努力實現為科學研究提供實驗細胞技術服務。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于我們的技術條件,中心不保證其準確性。
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