當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>ATCC細胞>>腫瘤細胞>> Cas9穩定表達的人結直腸腺癌細胞;HCT116-Cas9-566培養
Cas9穩定表達的人結直腸腺癌細胞;HCT116-Cas9-566培養質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,進口來源,保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
細胞名稱 Cas9穩定表達的人結直腸腺癌細胞;HCT116-Cas9-566培養
形態特性 上皮樣;多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使HCT116細胞穩定表達Cas9-Flag-Puromycin,經2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆,經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養條件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS;2ug/ml Puromycin
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:7,10;D12S391:17,21;D13S317:10,12;D16S539:11,13;D18S51:17,17;D19S433:12,13;D21S11:29,30;D2S1338:16,16;D3S1358:12,19;D5S818:10,11;D6S1043:13,13;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:18,23;Penta E:13,14;TH01:8,8;TPOX:8,8;vWA:17,22;
同工酶
染色體
使用權限 A類
Cas9穩定表達的人結直腸腺癌細胞;HCT116-Cas9-566培養細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
CD84 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD84 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0164NAMALWA(人Burkitt's淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2
人心臟成纖維細胞-心室裂解物HCF-av L
CCD-1095Sk細胞,人浸潤性導管癌旁皮膚細胞 鼠肝癌細胞,H22-H8D8細胞 腦成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
BC3H1(小鼠腦瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
HUASMC Pellet 人臍動脈平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人前列腺上皮細胞裂解物HPEpiCL
MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞 Mouse
CM-R008大鼠支氣管成纖維細胞*培養基100mL
人臍帶間葉干細胞(臍帶)(HUMSC) (5×105)
小鼠腎足細胞;Mouse podocyte 小鼠肝內膽管上皮細胞*培養基 100mL
人腦瘤細胞;SF17
GPA33 Others Mouse 小鼠 GPA33 / Glycoprotein A33 人細胞裂解液 (陽性對照)
人皮膚成纖維樣細胞;HSF2
人腸平滑肌細胞(HISMC)( 5×105 )
CL-0366IAR20(大鼠肝細胞)5×106cells/瓶×2
人肺癌細胞;A-427 [A427] 大鼠破骨細胞*培養基 100mL
EL4.IL-2 小鼠淋巴瘤細胞
MET Others Mouse 小鼠 c-MET / HGFR 人細胞裂解液 (陽性對照)
含225mlGN增菌液均質袋用于志賀氏菌的增菌培養,亦可用于沙門氏菌增菌培養。
BacterialorganophosphorusMedium
苯*脫氨酶培養基 Phenylalanine Deaminase Medium 100 用于苯*脫氨酶試驗
改良Letheen肉湯基礎250g/瓶用于化妝品衛生微生物檢測(ISO),每升培養基中需添加0204incubationmedia改良Letheen肉湯基礎250g/瓶用于化妝品衛生微生物檢測(ISO),每升培養基中需添加0204
PALCAMAgar
BLAgarMedium
42℃生長培養基 42℃growth Medium 用于副溶血性弧菌42℃生長試驗(SN標準)
無菌豬血清 Sterile Defidrinated Pig Blood 100毫升 BR
改良GAM瓊脂基礎250g/瓶用于厭氧菌培養,每培養基中添加22可選擇性添加222各ncubationmedia改良GAM瓊脂基礎250g/瓶用于厭氧菌培養,每培養基中添加22可選擇性添加222各1支
MI培養基 1000ml 用于濾膜法計數飲用水中大腸埃希氏菌和大腸菌群
Cas9穩定表達的人結直腸腺癌細胞;HCT116-Cas9-566培養鹽煌綠增菌液基礎250g
艾格瓊脂 250g 用于生產過程中無菌監測(Acumedia方法)
TMP瓊脂培養基 TMP Agar 250 用于*的分離培養
蛋白胨水培養基250g/瓶用于細菌靛基質試驗incubationmedia蛋白胨水培養基250g/瓶用于細菌靛基質試驗
改良Skirrow氏瓊脂平板(9cm) 10個/包 用于彎曲桿菌的分離培養
Cas9穩定表達的人結直腸腺癌細胞;HCT116-Cas9-566培養培養溫馨提示:
1)公司努力實現為科學研究提供實驗細胞技術服務。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于我們的技術條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉讓及使用細胞的時候要遵守國內外有關的法律法規,充分考慮可能存在的風險和責任,采取適當的安全和處理措施盡量降低對健康或環境的危害。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。