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更新時間:2017-09-07 12:01:49瀏覽次數(shù):107次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達的人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3-Cas9-564圖片
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使SK-OV-3細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 1:2~1:6傳代;每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:11,11;D12S391:22,22;D13S317:8,11;D16S539:12,12;D18S51:16,17,18;D19S433:14,14.2;D21S11:30,31.2;D2S1338:18,23;D3S1358:14,14;D5S818:10,11;D6S1043:12,12;D7S820:13,14;D8S1179:14,15;FGA:24,25;Penta E:5,13;TH01:9,9.3;TPOX:8,11;vWA:17,18;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達的人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3-Cas9-564圖片質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
Cas9穩(wěn)定表達的人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3-Cas9-564圖片細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
Cas9穩(wěn)定表達的人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3-Cas9-564圖片培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實現(xiàn)為科學(xué)研究提供實驗細胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關(guān)信息進行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險和責(zé)任,采取適當?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。
GSK3B Others Human 人 GSK3B 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0168Neuro-2a/N2a(小鼠腦神經(jīng)瘤細胞)5×106cells/瓶×2
人視網(wǎng)膜色素上皮細胞裂解物HRPEpiCL
NCI-H1755[H1755]細胞,人肺癌細胞 人胚肺成纖維細胞,HELF細胞 卵巢上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
兔主動脈平滑肌細胞;SMC
TIMP2 Others Human 人 TIMP2 / TIMP-2 人細胞裂解液 (陽性對照)
NSC,大鼠神經(jīng)干細胞 Rattus
CM-H128人角膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
20. 細胞系統(tǒng)
小鼠子細胞;U14 小鼠肝竇內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
人神經(jīng)膠質(zhì)細胞瘤細胞;U251
F2 Others Mouse 小鼠 FII / F2 / Thrombin 人細胞裂解液 (陽性對照)
人非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H2087
人表皮淋巴內(nèi)管皮細胞(HDLEC)(5×105)
HUVEC-12, 人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞系
人Burkkit淋巴瘤細胞;Daudi 大鼠腎小球內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
MMQ 小鼠垂體瘤細胞
FETUB Others Human 人 Fetuin-B / FETUB 人細胞裂解液 (陽性對照)
TetrathionateBroth
根瘤菌培養(yǎng)基 250g 用于根瘤菌平板計數(shù)
坂崎桿菌顯色培養(yǎng)基 Enterobacter sakazakii Chromogenic Medium 1000ml 用于坂崎桿菌的顯色培養(yǎng),坂崎桿菌顯藍色,其它腸桿菌顯無色。
血液*250g/瓶用于血液中致病菌的分離incubationmedia血液*250g/瓶用于血液中致病菌的分離
MRSAgar
尿素瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)23090250g用于鑒別腸道菌尿素酶試驗
4411-prf PEpiCM-prf 前列腺上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 4411-prf PEpiCM-prf 前列腺上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml
TryptoseSoyaAgar
草酸鉀兔血漿0.2ml*20用于溶血性鏈球菌的檢驗
BF839菌計數(shù)選擇培養(yǎng)基 250g 用于脆弱擬桿菌BF839固體平板計數(shù)
Cas9穩(wěn)定表達的人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3-Cas9-564圖片鹽胱酸增菌液SC20支/包用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)
假單胞分離肉湯 250g 用于假單胞菌群增菌培養(yǎng)
YM11瓊脂 YM11 Agar 250 濾膜法用于霉菌、酵母菌的分離培養(yǎng)(NEOGEN方法)
Eugon瓊脂250g/瓶廣泛用于微生物的培養(yǎng)incubationmediaEugon瓊脂250g/瓶廣泛用于微生物的培養(yǎng)
ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar
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