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Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-558培養(yǎng)

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更新時間:2017-09-07 12:06:00瀏覽次數(shù):178次

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Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-558培養(yǎng)現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。

細胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-558培養(yǎng)
形態(tài)特性   上皮樣;多角形
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA
培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS400ug/ml G418
傳代方法  1:2~1:4傳代;每周2~3次。 
傳代情況  C3
凍存條件   基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養(yǎng)法(- 
STR   Amelogeninx,xCSF1PO10,12D12S39122,22D13S31711,11D16S53911,11D18S5112,12D19S43311,16D21S1128,28D2S133823,24D3S135817,17D5S81811,13D6S104311,12D7S8208,10D8S117914,15FGA21,21;;Penta E7,14TH017,8TPOX8,11vWA15,15
同工酶

染色體

使用權(quán)限 A
Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-558培養(yǎng)質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCCECACCDSMZJCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-558培養(yǎng)細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1213的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-558培養(yǎng)培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實現(xiàn)為科學研究提供實驗細胞技術(shù)服務。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關(guān)信息進行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風險和責任,采取適當?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。

CD58 Others Human LFA-3 / CD58 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0180P388D1(小鼠淋巴樣瘤細胞)5×106cells/瓶×2

人間充質(zhì)干細胞-脂肪裂解物HMSC-ad L

ER-30細胞,人癌細胞 大鼠腺癌細胞系,MADB106細胞 淋巴成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

B16-F1(小鼠黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

NHEM.f M2 Pellet 正常人表皮黑素細胞團塊(少年者),培養(yǎng)在M2培養(yǎng)液中 > 1 mio.cells 人氣管上皮細胞裂解物HTEpiCL
RA, 大鼠星形膠質(zhì)細胞 Rattus

CM-H080人主動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL

人臍帶靜脈平滑肌細胞 (HUVSMC)( 5×105 )

小鼠結(jié)腸癌細胞;CT26.WT [CT26WT] 小鼠腸上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0919

ACVR1B Others Human ALK4 / ACVR1B 人細胞裂解液 (陽性對照)
小耳豬肺細胞;SEP-L2

人膀胱平滑肌細胞(HBdSMC)( 5×105 )

CL-0163MSTO-211H(人肺癌細胞)5×106cells/瓶×2

人肺支氣管癌細胞;NCI-H1650 大鼠嗅鞘細胞*培養(yǎng)基 100mL

raw264.7 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞

CHST3 Others Mouse 小鼠 CHST3 / C6ST-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
柯氏尿素瓊脂250g用于細菌脲酶檢測

氣單胞菌培養(yǎng)基添加劑 5 每支添加劑加入100ml氣單胞菌培養(yǎng)基基礎

WS 瓊脂 WS Salmonella Agar 250 用于沙門氏菌的選擇性分離(GB標準)

明膠培養(yǎng)基250g/瓶用于細菌的明膠生化試驗incubationmedia明膠培養(yǎng)基250g/瓶用于細菌的明膠生化試驗

GentamycinAgar
TMAOMedium

50020 BR 500g incubation media 50020 BR 500g

根霉屬的菌 控制應變檢測副溶血性弧菌 /

LB肉湯(Lennox)250用于基因工程菌大腸桿菌培養(yǎng)

DTM添加劑1 1ml*5 每支添加于200mlDTM培養(yǎng)基中
Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-558培養(yǎng)亞鹽瓊脂250g用于厭氧亞鹽還原桿菌的試管計數(shù)(SN標準)

TryptoseSoyaAgar

乙基紫疊氮鈉肉湯 Ethyl Violet Azide Broth 250 用于鏈球菌的增菌培養(yǎng)

GN增菌液250g/瓶用于志賀氏菌增菌incubationmediaGN增菌液250g/瓶用于志賀氏菌增菌

TryptoseSoyaAgar

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