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Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-554培養質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,進口來源,保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
細胞名稱 Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-554培養
形態特性 上皮樣;多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo,經400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 1:2~1:4傳代;每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:10,12;D12S391:22,22;D13S317:11,11;D16S539:11,11;D18S51:12,12;D19S433:11,16;D21S11:28,28;D2S1338:23,24;D3S1358:17,17;D5S818:11,13;D6S1043:11,12;D7S820:8,10;D8S1179:14,15;FGA:21,21;;Penta E:7,14;TH01:7,8;TPOX:8,11;vWA:15,15;
同工酶
染色體
使用權限 A類
Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-554培養細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
TSPAN1 Others Human 人 TSPAN1 (aa 110-211) 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0188QGY-7701(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2
人臍靜脈平滑肌細胞裂解物HUVSMCL
MB-271細胞,人癌細胞 中國倉鼠腎細胞(二氫*還原酶缺陷型),CHO/dhFr-細胞 角膜上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
AML-193(人急性單核細胞白血病單核細胞) 5×106cells/瓶×2
NHEM.f Pellet 正常人表皮黑素細胞團塊(少年者) > 1 mio.cells 人腸平滑肌細胞裂解物HISMCL
RDFs, 大鼠真皮成纖維細胞 Rattus
CM-H048人胃粘膜上皮細胞*培養基100mL
大鼠腦膜細胞(RMC)(5×105)
小鼠神經母細胞瘤細胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a] 小鼠卵巢顆粒細胞*培養基 100mL
人肝永生化細胞;THLE-3
FGFR1 Others Mouse 小鼠 FGFR1 / CD331 人細胞裂解液 (陽性對照)
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;Mao
二:大鼠正常細胞
CM-H064人腎上皮細胞*培養基100mL
小鼠網織細胞肉瘤;M5076 小鼠腸巨噬細胞*培養基 100mL
rRTEC, 大鼠腎小管上皮細胞 Rattus
SMOC1 Others Human 人 SMOC1 人細胞裂解液 (陽性對照)
H-頂層培養基250g用于鼠傷寒沙門氏桿菌回復突變試驗(Ames試驗)
C.L.E.DMedium
VRBG 瓊脂 VRBGA Agar 250 用于奶粉中坂崎桿菌的分離培養(FDA方法)
溴甲酚紫瓊脂基礎(糖發酵基礎)250g/瓶選擇性添加0.5-用于細菌的分離和鑒別incubationmedia溴甲酚紫瓊脂基礎(糖發酵基礎)250g/瓶選擇性添加0.5-用于細菌的分離和鑒別
GVPCAgarBase
BF839BacteriumCountSelectiveMedium
50062 BR 30kg incubation media 50062 BR 30kg
鰒發光桿菌 支/瓶
VTMBroth
30%DextroseBroth
Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-554培養亞鐵瓊脂28023250g用于厭氧亞還原梭狀芽孢桿菌的檢測(SN/T2002)
12207 豬肺疫疫苗培養基 1 萬 ml/袋 用于豬肺疫疫苗制備 incubation media 12207 豬肺疫疫苗培養基 1 萬 ml/袋 用于豬肺疫疫苗制備
Half-Fraser培養基 225ml/袋*10 用于李氏菌的增菌培養
改良Giolitti-Cantobi肉湯250g用于*的增菌培養
HelicobacterPyloriMedium
Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-554培養培養溫馨提示:
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2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于我們的技術條件,中心不保證其準確性。
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