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小鼠胚胎成纖維細胞;MEF圖片培養溫馨提示:
1)公司努力實現為科學研究提供實驗細胞技術服務。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于我們的技術條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉讓及使用細胞的時候要遵守國內外有關的法律法規,充分考慮可能存在的風險和責任,采取適當的安全和處理措施盡量降低對健康或環境的危害。
細胞名稱 小鼠胚胎成纖維細胞;MEF圖片
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 取孕9天的615小鼠胚胎,去除腦、心臟等培養建立。該細胞可用作飼養層細胞,支持胚胎干細胞ES的生長并維持ES未分化的狀態。當作為飼養層細胞時,MEF需裂霉素C處理停止生長。建議作為ES細胞的飼養層時,MEF不要超過6代。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%CS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 P1
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
小鼠胚胎成纖維細胞;MEF圖片細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
C2 Others Mouse 小鼠 C2 / Complement Component 2 人細胞裂解液 (陽性對照)
間充質干細胞生長添加物MSCGS
人B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS(RA.1)
大鼠垂體瘤細胞;GH3 膀胱移行細胞癌細胞,T24細胞 MDBK (NBL-1)細胞,牛腎細胞
HNE2, 人鼻咽癌細胞系 Human
LUM Others Human 人 LUM / Lumican / LDC 人細胞裂解液 (陽性對照)
非洲綠猴腎細胞;GL-37
破骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
GLIPR1 Others Mouse 小鼠 GLIPR1 / RTVP1 人細胞裂解液 (陽性對照)
Cyc-tAg細胞,小鼠T淋巴細胞瘤(SV40T抗原轉染) 人卵巢癌*耐藥株,A2780/Taxol細胞 人肺動脈成纖維細胞裂解物HPAFL
狗肺成纖維樣細胞;DogL1
IGF1R Others Human 人 IGF1R 人細胞裂解液 (陽性對照)
間充質干細胞生長添加物MSCGS
C2 Others Mouse 小鼠 C2 / Complement Component 2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS(RA.1)
大鼠垂體瘤細胞;GH3 膀胱移行細胞癌細胞,T24細胞 MDBK (NBL-1)細胞,牛腎細胞
HNE2, 人鼻咽癌細胞系 Human
LUM Others Human 人 LUM / Lumican / LDC 人細胞裂解液 (陽性對照)
TRIS1.0MPH7.5STERILETris溶液超純級500MLRT
8-Azaguanine 1vial/1vial*5 Sigma A5284
D-GlutamineD-谷酸-5-酰胺5克BR,99%
三基醋銫 98% Cqsium 2,2-dimqthylpropcnoctq, Cqsium trimqthylccqtctq 044-70-0
2′-脫氧胸苷-5′-三嶙酸四鈉鹽shēng huà shì jì容量:RT1克
(本基基)本磺酸鋇鹽,英文名或英文縮寫:Barium dipxenylamine sulfonate,級別:BR,規格:1克
硅同 SE-30 SILICONq OV-1
2,7-Diacetylfluorene 39665-89-9
原花青素 proanthocyanidins (≥98%,HPLC) 4852-22-6 20MG 標準品
DEAE葡聚糖凝膠A-50/DEAE Sephadex A-50 應用:中等大小生物分子(30-200KD);載量3-4mmol/g 25、100、500克 Pharmacia原裝
小鼠胚胎成纖維細胞;MEF圖片苯正丁酯/苯丁酯/Butyl benzoate CP,98.5% 500毫升 國產/進口
DNAMarkerⅢshēng huà shì jì容量:25克
嘌呤;四氮雜茚;7-咪坐并(4,5-d)嘧啶 Purinq 10-73-0
轉鐵蛋白/鐵傳遞蛋白/Transferrin human/TF/TRF BR,98% 10毫克 國產/進口
N,N-二異丙基 N,N-Diisopropylethylenediamine,≥97.0% 121-05-1 25ML 通用試劑
小鼠胚胎成纖維細胞;MEF圖片質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,進口來源,保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
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