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小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3培養培養溫馨提示:
1)公司努力實現為科學研究提供實驗細胞技術服務。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于我們的技術條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉讓及使用細胞的時候要遵守國內外有關的法律法規,充分考慮可能存在的風險和責任,采取適當的安全和處理措施盡量降低對健康或環境的危害。
細胞名稱 小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3培養
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 NIH/3T3是從NIH Swiss小鼠胚胎培養物中建立的高度接觸性抑制的連續傳代細胞株。為了培育在形態學特征上更適合于進行轉化分析的亞株,建立的NIH/3T3細胞株又進行了5輪以上亞克隆。該細胞株對肉瘤病毒的轉化灶形成和白血病病毒的繁殖高度敏感,對DNA轉化及轉染研究十分有用。鼠痘病毒陰性。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C84
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR 鑒定
同工酶
染色體
使用權限 A類
小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3培養細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
1,2,6-己三醇25克2~8℃,避光
(E)-1,2-二錄烯(含穩定劑氧基輕醌) TRcNS-1,2-DICHLOROqTHYLqNq 126-60-2
4-Chloropxenylhydrezine xy7nochloride 1073-70-7
4-溴異丙苯 1-Bromo-4-isopropylbenzene,≥95.0% 586-61-8 1ML 通用試劑
β-葡聚糖/β-D-葡聚糖/β-D-Glucan from barley 試劑 50、100、500、1000mg gersion
1,5-disulfonicacid阿姆斯特朗酸1克高純,98%
923-32-0DL-胱酸;DL-3,3′-二硫代雙(2-基丙酸); DL-雙硫代丙酸DL-Cystine;
Lipase(Candida)脂肪水解酶25克BR,類型F-300,130u/mg
酯酶 Sulfatase from Helix pomatia 9016-17-5 5KU 通用試劑
加醋銨 99% Formic ccid 瞇達
脂質體2000250克
526-08-9磺胺本吡唑SULFApxenAZOLE
4-Butoxy-3-chloropxenylboronic acid 480438-55-9
3-*基硅氧基-1-... 3-Trimethylsiloxy-1-propyne,99% 5582-62-7 5G 通用試劑
β-奈乙酸shēng huà shì jì容量:RT100克
上皮細胞培養基MEpiCM-prf
HA Others H7N2 甲型流感 H7N2 (A/ruddy turnstone/New Jersey/563/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0910
大鼠氣管上皮細胞;RTE 慢性髓原白血病細胞,K-562細胞 P3X63Ag8.653細胞,小鼠骨髓瘤細胞
ACHN, 人腎細胞腺癌細胞 Human
CRTAM Others Human 人 CRTAM 人細胞裂解液 (陽性對照)
人脂肪間充質干細胞(脂肪)(HMSC-ad)(5×105)
人紅系白血病細胞;TF-1
CM-R024大鼠淋巴成纖維細胞*培養基100mL
小鼠腎集合管細胞(SV40轉化);M-1 小鼠小腸血管內皮細胞*培養基 100mL
CSC, 小鼠心肌細胞 Mouse
SPARC Others Mouse 小鼠 SPARC / BM-40 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3培養T-24(人膀胱癌細胞) 5×106cells/瓶×2
小鼠樹突狀細胞肉瘤低轉移細胞(綠色熒光蛋白標記);DG6-GFP
EPDR1 Others Human 人 EPDR1 人細胞裂解液 (陽性對照)
HPAEpiC細胞,人肺泡上皮細胞 小鼠腎小球系膜細胞,MES-13細胞 CL-0090Hacat(人永生化角質形成細胞)5×106cells/瓶×2
神經元細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
HPMEC-c 人肺微血管內皮細胞(HPMEC) 500,000cells 腦動脈血管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3培養質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,進口來源,保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
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