1）ELISA邊緣效應(yīng)是由溫育形成的。所以溫育一般采用能 使反應(yīng)液溫度迅速達(dá)到平衡的水浴法。一種放在水浴箱的隔板上，另一種是放在溫箱的濕盒里。水要浸至板條的1/3處，不可將板條疊加放置。
2）邊緣效應(yīng)（2ng/mlHBsAg一步法三種不同溫育法的結(jié)果）
洗滌
3）ELISA是靠洗滌來(lái)達(dá)到分離結(jié)合與未結(jié)合抗原抗體復(fù)合物及酶標(biāo)記物的目的，同時(shí)洗滌也可將非特異吸附的蛋白質(zhì)的干擾以及血球、細(xì)菌中的酶干擾清除掉。
4）手工洗滌一般采用浸泡方法：
（1）甩去孔內(nèi)反應(yīng)液；
（2）用洗滌液過(guò)洗一遍（即注滿(mǎn)孔后即甩去）；
（3）微孔重新注滿(mǎn)洗液后浸泡2-3分鐘，間歇搖動(dòng)；
（4）甩去孔內(nèi)液體，拍板，用紙吸干。
重復(fù)以上操作至少5次。注意各種試劑盒的洗滌液盡量不要混用。
洗板機(jī)洗板一定要預(yù)先把板架放平，使洗板機(jī)上的每個(gè)放液和吸液纖孔都能一致地插入孔底，將孔內(nèi)液體全部吸干，同時(shí)要設(shè)置一定的 浸泡時(shí)間。如出現(xiàn)機(jī)洗后拍板有較多殘留液時(shí)應(yīng)再用手工洗2次以上。關(guān)機(jī)前要用蒸溜水沖洗管道，避免堵孔。