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所 在 地上海市
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更新時間:2017-08-07 10:40:25瀏覽次數(shù):123次
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
產(chǎn)品名稱:人臍靜脈平滑肌細胞操作方法
英文名稱:Human umbilical vein smooth muscle cells
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0004
人臍靜脈平滑肌細胞操作方法的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
人臍靜脈平滑肌細胞操作方法培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
人膠原凝集素(Collectin)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Collectin ELISA Kit
人伴侶蛋白10(CPN10)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human chaperonin 10,CPN10 ELISA Kit
人纖調(diào)蛋白(FMOD)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human fibromodulin,FMOD ELISA Kit
人鈣網(wǎng)蛋白(CRT)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Calreticulin,CRT ELISA Kit
人網(wǎng)膜素(omentin)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human omentin ELISA Kit
人基質(zhì)γ羧基*蛋白(MGP)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Matrix Gla Protein,MGP ELISA Kit
人基質(zhì)裂解蛋白/基質(zhì)溶素(MAT)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human matrilysin,MAT ELISA Kit
人溶酶體相關(guān)膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human human lysosomal-associated membrane protein 2,HLAMP-2 ELISA Kit
人軟骨糖蛋白39(HC gp-39)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Cartilage glycoprotein 39,HC gp-39 ELISA Kit
人不透光相關(guān)蛋白(OPAs)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Opacity-associated proteins,OPAs ELISA Kit
人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human flagellin ELISA Kit
人多聚血清蛋白(PHSA)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Poly Serium Antigen,PHSA ELISA Kit
人胞漿免疫球蛋白(CIg)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human cytoplasmic immunoglobulin,CIg ELISA Kit
人纖維介素蛋白(fgl2)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Fibrinogen like peptide 2,fgl2 ELISA Kit
人泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Ubiquitin,Ub ELISA Kit
人類粘蛋白(ORM)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human orosomucoid,ORM ELISA Kit
人彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Elastin,ELN ELISA Kit
人套膜蛋白(iNV)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Involucrin,iNV ELISA Kit
人肌腱蛋白R(TN-R)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human tenascin-R,TN-R ELISA Kit
人生長相關(guān)蛋白43(GAP-43)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human growth-associated protein 43,GAP-43 ELISA Kit
人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Cyclic AMP response element binding protein,CREB ELISA Kit
人聚集蛋白(Agrin)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Agrin ELISA Kit
人Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Agouti Related Protein,AGRP ELISA Kit
人膜輔蛋白(MCP/CD46)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human membrane cofactor protein,MCP ELISA Kit
人延伸蛋白A(EloA)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human elongin A,EloA ELISA Kit
人酰化刺激蛋白(ASP)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Acylation Stimulating Protein,ASP ELISA Kit
人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human bactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPI ELISA Kit
人細胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白(MEPE)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE ELISA Kit
人復(fù)制蛋白A(RPA-70)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human replication protein A,RPA-70 ELISA Kit
人軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human cartilage oligomeric matrix protein,COMP ELISA Kit
人抗原提呈相關(guān)轉(zhuǎn)運蛋白/T細胞活化蛋白(TAP)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human transporter associated with antigen processing,TAP ELISA Kit
人免疫抑制酸性蛋白(IAP)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human immunosuppressive acidic protein,IAP ELISA Kit
人麥角蛋白IgA(Gliadin-IgA)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Gliadin IgA ELISA Kit
人發(fā)動蛋白2(DNM2)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human dynamin 2,DNM2 ELISA Kit
人著絲粒蛋白B(CENP-B)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Centromere Protein,CENP-B ELISA Kit
人巨噬細胞刺激蛋白(MSP)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human macrophage stimulating protein,MSP ELISA Kit
人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human mammalian target of rapamyein,mTOR ELISA Kit
人核基質(zhì)蛋白22(NMP-22)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Nuclear matrix protein 22,NMP-22 ELISA Kit
人軟骨寡聚蛋白(COMP)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human cartilage oligomeric protein,COMP ELISA Kit
人多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human multidrug resistance-associated protein,MRP ELISA Kit
人高速泳動蛋白17(HMG-17)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human high mobility group protein 17,HMG-17 ELISA Kit
人空泡毒素相關(guān)蛋白A(VacA)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Vacuolating cytotoxin A,VacA ELISA Kit
人玻連蛋白/體外粘連蛋白(VN/CD51+CD61)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human vitronectin,VNR ELISA Kit
人波形蛋白(VIM)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human vimentin,VIM ELISA Kit
人表面活性蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Surfactant Protein D,SP-D ELISA Kit
人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human arabinogalactan proteins,AGPs ELISA Kit
人N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-*(AcSDKP)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit
人腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Neuroglobin,NGB ELISA Kit
人的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA試劑盒 進口/分裝 Human rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit
人β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit
人巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human macrophage inflammatory protein 2,MIP-2 ELISA Kit
人凝膠原蛋白(gelson)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human gelson ELISA Kit
人踝蛋白(talin)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human talin ELISA Kit
人臍靜脈平滑肌細胞操作方法人角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit
小鼠FMS樣*激酶3配體(Flt3L)ELISA試劑盒 進口/分裝 Mouse FMS-like tyrosine kinase 3 ligand,Flt-3L ELISA Kit
小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒 進口/分裝 Mouse
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