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人腦血管平滑肌細(xì)胞運(yùn)輸

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

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更新時(shí)間:2017-08-07 10:49:43瀏覽次數(shù):106次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
人腦血管平滑肌細(xì)胞運(yùn)輸,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。

產(chǎn)品名稱:人腦血管平滑肌細(xì)胞運(yùn)輸
英文名稱:Human brain vascular smooth muscle cells
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號(hào):FS-X0017
人腦血管平滑肌細(xì)胞運(yùn)輸的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
人腦血管平滑肌細(xì)胞運(yùn)輸收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2)請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號(hào)21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

Annexin Ⅴ,ANX-Ⅴ ELISA Kit 
人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human tubular basement membrane antibogy,TBM ELISA Kit
人apelin 13(AP13)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human apelin 13,AP13 ELISA Kit 
人Apelin 36(AP36)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human Apelin 36,AP12 ELISA Kit
人血管緊張素Ⅱ受體Ⅰa型(AgtrⅠa)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    human angiotensin Ⅱ receptor type Ⅰa,AgtrⅠa ELISA Kit
人血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human angiopoietin-like protein 3,ANGPTL3 ELISA Kit 
人α肌動(dòng)蛋白(α Actin)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human Alpha-Actin,α Actin ELISA Kit
人心肌錨蛋白重復(fù)域1(ANKRD1)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human cardiac ankyrin repeat domain 1,ANKRD1 ELISA Kit
人瘦素受體(LEPR)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human Leptin Receptor,LEPR ELISA Kit
人血管緊張素Ⅱ受體2(AT2R)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human Angiotensin Ⅱ Receptor 2,AT2R ELISA Kit 
人血管緊張素Ⅱ受體1(ANGⅡR-1)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human angiotension Ⅱ receptor 1,ANGⅡR-1 ELISA Kit
人血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human Angiopoietin 4,ANG-4 ELISA Kit 
人可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human soluble myosin heavy chain 1,sMHC-1 ELISA Kit
人熱休克因子1(HSF-1)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human Heat Shock Factor 1,HSF1 ELISA Kit
人血管活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human vasopeptidase inhibitors,VPI ELISA Kit
人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human Cardiac myosin-light chains 1,CMLC-1 ELISA Kit
人缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human Ischemia Modified Albumin,IMA ELISA Kit
人8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human 8-epi-prostaglandin F2alpha,8-epi-PGF2α ELISA Kit
人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human Vascular Endothelial-Cadherin Complex,VE-cad ELISA Kit
人α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human α-Smooth muscle actin,α-SMA ELISA Kit
人α橫紋肌肌動(dòng)蛋白(α-SCA)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human α-sarcomeric actin,α-SCA ELISA Kit
人平滑肌肌球蛋白(SMM)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human smooth muscle Myosin,SMM ELISA Kit
人心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human cardiac isoform of Tropnin T,c ELISA Kit
人腦血管平滑肌細(xì)胞運(yùn)輸人肌球蛋白重鏈(MHC)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human myosin heavy chain,MHC ELISA Kit
人熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human Heat Shock Protein glycoprotein 96,HSP gp96 ELISA Kit
人心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human cardiotrophln 1,CT-1 ELISA Kit

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