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5-8F 人高轉移鼻咽癌細胞系保存運輸

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更新時間:2017-08-07 14:50:54瀏覽次數:230次

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產地 進口 加工定制
適用領域 科研
5-8F 人高轉移鼻咽癌細胞系保存運輸,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。

產品名稱:5-8F 人高轉移鼻咽癌細胞系保存運輸
英文名稱:5-8Fhighly metastaticnasopharyngeal carcinoma cell line
規格:5×105cells/瓶
產品貨號:FS-X0148
5-8F 人高轉移鼻咽癌細胞系保存運輸的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養基,添加6ml本公司附帶的*培養基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的*培養基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得
5-8F 人高轉移鼻咽癌細胞系保存運輸培養操作流程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備F-12K培養基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養基的T-25培養瓶中或含有14ml培養基的T-75培養瓶中培養。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

 非酶細胞裂解液    英文名稱:    NECDS    規格:    100 ml        
細胞凍存液    英文名稱:    CFM    規格:    50 ml        
無血清細胞凍存液    英文名稱:    SF-CFM    規格:    50 ml        
臺盼藍    英文名稱:    TB    規格:    50 ml        
磷酸鹽緩沖注    英文名稱:    DPBS    規格:    500 ml        
*    英文名稱:    HBSS    規格:    500 ml        
多聚賴氨酸 1 mg/ml    英文名稱:    PLL    規格:    1 ml        
多聚賴氨酸10 mg/ml    英文名稱:    PLL    規格:    1 ml        
胎牛血清    英文名稱:    FBS    規格:    500 ml        
*/*溶液    英文名稱:    P/S    規格:    5 ml        
*/*溶液    英文名稱:    P/S    規格:    100 ml        
抗真菌溶液    英文名稱:    AMS    規格:    50 ml        
抗霉菌溶液    英文名稱:    ABAMS    規格:    50 ml        
細胞培養超純水    英文名稱:    CCGW    規格:    500 ml        
肌細胞分離液    英文名稱:    MDS    規格:    100 ml        
牛腦垂體提取物    英文名稱:    BPE    規格:    25 mg        
牛腦垂體提取物    英文名稱:    BPE    規格:    100 mg        
胰島素鐵硒傳遞蛋白 100x    英文名稱:    ITS    規格:    10 ml        
左旋*溶液 200 mM    英文名稱:    L-Gue    規格:    100 ml        
非必需氨基酸 100X    英文名稱:    NEAA    規格:    100 ml        
纖維粘連蛋白-牛源    英文名稱:    BPF    規格:    1mg        
I 型膠原細胞檢測試劑盒    英文名稱:    Col    規格:    48 tests/48 well plate        
纖維母細胞粘附檢測試劑盒    英文名稱:    Fibro    規格:    48 tests/48 well plate        
MTT細胞活力和增殖檢測試劑盒    英文名稱:    MTT    規格:    1000 tests/96 well plate        
WST-1細胞活力和增殖檢測試劑盒    英文名稱:    WST    規格:    1000 tests/96 well plate        
細胞衰老檢測試劑盒    英文名稱:    CSA    規格:    50 tests/53 mm plate        
5-8F 人高轉移鼻咽癌細胞系保存運輸β-半乳糖苷酶比色檢測試劑盒    英文名稱:    GalC    規格:    50 tests/53 mm plate        
LDH細胞毒性檢測試劑盒    英文名稱:    LDH    規格:    500 tests/96 well plate        
TUNEL色標法細胞凋亡檢測試劑盒    英文名稱:    TUNEL    規格:    50 tests/96 well plate        
一氧化氮色標法檢測試劑盒    英文名稱:    NO    規格:    250 tests/96 well plate        
硝基苯磷酸鈉(pNPP)磷酸酶檢測試劑盒    英文名稱:    pNPP    規格:    500 tests/96 well plate        
孔雀綠磷酸鹽檢測試劑盒    英文名稱:    MGmP    規格:    2500 tests/96 well plate        
比色法鈣分析試劑盒    英文名稱:    CCA    規格:    250 tests/96 well plate        
活/死細胞染色試劑盒    英文名稱:    CSK    規格:    1000 tests/96 well plate        
比色法GAPDH分析試劑盒    英文名稱:    GAPDH    規格:    1000 tests/96 well plate        

 

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