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產品名稱:H-97(人高轉移肝癌細胞)*
英文名稱:H-97(highly metastatic human hepatocellular carcinoma cell)
規格:5×105cells/瓶
產品貨號:FS-X0832
H-97(人高轉移肝癌細胞)*的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養基,添加6ml本公司附帶的*培養基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的*培養基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得。
H-97(人高轉移肝癌細胞)*培養操作流程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備F-12K培養基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養基的T-25培養瓶中或含有14ml培養基的T-75培養瓶中培養。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
MCP-4/CCL13 ELISA Kit 大鼠單核細胞趨化蛋白4 96T
PPAR- Alpha ELISA Kit 大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α 96T
M-CSF(Human Macrophage Colony-Stimulating Factor) ELISA kit 人巨噬細胞集落刺激因子 96T
P-PKC(Mouse phospho Protein Kinase C) ELISA Kit 小鼠磷酸化蛋白激酶C 96T
MIC-1 human ELISA kit 人巨噬細胞抑制因子-1 ELISA 試劑盒 96T
MCP-3/CCL7(Human monocyte chemotactic protein 3) ELISA kit 人單核細胞趨化蛋白3 96T
pERK(Mouse phospho-extracellular signal-regulated kinase) ELISA Kit 小鼠磷酸化細胞外信號調節激酶 96T
CAM ELISA Kit 大鼠鈣調素 96T
CCB(Mouse calcium channel blockers) ELISA Kit 小鼠鈣通道阻滯劑 96T
Apo-E ELISA Kit 大鼠載脂蛋白E 96T
MCP-2/CCL8(Human monocyte chemotactic protein 2) ELISA kit 人單核細胞趨化蛋白2 96T
MCP-1/CCL2/MCAF(Human monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor) ELISA kit 人單核細胞趨化蛋白1 96T
ALT/GPT(Mouse Alanine Aminotransferase) ELISA Kit 小鼠*轉氨酶/谷丙轉氨酶 96T
omentin ELISA Kit 大鼠網膜素 96T
BMPs(Mouse bone morphogenetic proteins) ELISA Kit 小鼠骨形成蛋白 96T
Human L-Selectin ELISA kit 人L選擇素 96T
OFQ/N ELISA Kit 大鼠孤腓肽 96T
PP ELISA Kit 大鼠蛋白磷酸酶 96T
RBP-4(Mouse Retinol-binding protein 4) ELISA Kit 小鼠*結合蛋白4 96T
IL-9(Human Interleukin 9) ELISA KIT 人白介素9 96T
IL-8/CXCL8(Human Interleukin 8) ELISA KIT 人白介素8 96T
6-keto-PGF1a(Mouse 6-keto-prostaglandin F1a) ELISA Kit 小鼠6酮前列腺素F1a 96T
TrxR ELISA Kit 大鼠硫氧還蛋白還原酶 96T
TH-97(人高轉移肝癌細胞)*rx ELISA Kit 大鼠硫氧化還原蛋白 96T
Pentosidine(Mouse Pentosidine) ELISA Kit 小鼠戊糖素 96T
IL-6(Human Interleukin 6) ELISA KIT 人白介素6 96T
Collagenase II ELISA Kit 大鼠膠原酶II 96T
AGEs(Mouse advanced glycation end products) ELISA Kit 小鼠晚期糖
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