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產地 | 進口 | 加工定制 | 是 |
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適用領域 | 科研 |
產品名稱:線粒體呼吸鏈復合體Ⅰ/NADH-輔酶Q還原酶測試盒25管/24樣
規格:25管/24樣
測試方法:紫外分光光度法
測定意義復合體Ⅰ(EC 1.6.5. 3)又稱NADH-CoQ 還原酶或NADH脫氫酶,廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞的線粒體中,是線粒體內膜中zui大的蛋白復合物。該酶催化一對電子從NADH傳遞給CoQ,同時可使O2還原生成O2.-,是呼吸電子傳遞鏈上產生O2.-的主要部位。測定該酶活性,不僅可以反映呼吸電子傳遞鏈(ETC)狀態,而且可以反映活性氧(ROS)生成狀態。
線粒體呼吸鏈復合體Ⅰ/NADH-輔酶Q還原酶測試盒25管/24樣主要特點為:
(1)應用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應學科的發展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度**是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。
(3)選擇性好
線粒體呼吸鏈復合體Ⅰ/NADH-輔酶Q還原酶測試盒25管/24樣目前已有些元素只要利用控制適當的顯色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內,如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。咨詢!
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經預富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速.
注意事項:
1.檢測前,檢查各種儀器,打開酶標儀,穩定20分鐘左右。
2.檢測樣本要澄清,不能含雜物,否則會直接影響結果。
3.實驗開始前要將試劑盒取出,室溫放置30-40分鐘,使各種試劑都恢復到室溫,以使檢測結果更為穩定。
4.盡量做雙標準實驗,這樣可以保證數據的準確性。
5.底物具有毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,要避免接觸。
6.實驗中,要使底物避光保存,酶標板均可拆卸,多余的部分應密封好,低溫保存。
操作流程:
1. 植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO)ELISA試劑盒進口國產從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
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