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當前位置：北京百奧創新科技有限公司>>技術文章>>RNA干擾（基因沉默）
項目內容概述
RNA干擾(RNAi，RNA Interference)是抵御外來病毒侵犯的一種防御機制，廣泛應用于功能基因組學、基因治療、靶藥物篩選、細胞信號通路分析、蛋白質互作等領域。具體來說，當dsRNA或pre-miRNA進入細胞后，能夠被特異的核酸內切酶（Dicer）識別并切割成為很小的片段，這些片段在解旋酶的作用下會解鏈。反義鏈在與體內一些酶結合形成RNA誘導的沉默復合物（RNA-Induced Silencing Complex，RISC），RISC與mRNA同源區進行特異性結合，若miRNA與mRNA的結合位點能夠*配對，則會切割mRNA；若miRNA與mRNA的結合位點不能夠*配對，則會抑制mRNA的翻譯過程。
目前實驗中主要采用miRNA、 shRNA 和siRNA 3種RNA干擾方法。shRNA是利用人源或鼠源的RNA聚合酶III（pol III）啟動子，對編碼短干擾RNA（siRNA）的DNA序列進行轉錄來實現RNA干擾。轉錄后的shRNA經加工，參與RISC的形成。與人工合成的siRNA相比，shRNA可以在較長時間內有效抑制細胞內靶基因的表達。miRNA是一類可以通過RNAi機制調節基因表達的內源性小RNA，人工miRNA與shRNA的設計原理基本相同，由于miRNA具有內源性，因此其更易產生有效的基因沉默。
我們擁有一系列shRNA/miRNA表達載體以及Sponge載體，同時提供包括shRNA/miRNA設計、慢病毒包裝、陽性克隆鑒定、單克隆培養、基因沉默細胞系構建等一系列實驗服務內容。
實驗流程
1、細胞預實驗。
2、慢病毒載體構建。
3、shRNA/miRNA功能驗證。
4、慢病毒包裝。
5、RNAi細胞系構建。
6、沉默效果檢測。
我們的優勢
1、提供各種實驗材料和儀器，滿足項目課題實驗需要。
2、專業的操作人員。
3、高規格實驗室。
4、數據結果交付周期快。
5、完善的服務體系，全程跟進，確保滿意。
服務流程
1、提交項目課題相關需求和資料。
2、與我們的專業技術團隊討論項目細節。
3、根據討論后的意見對實驗方案進行修改。
4、雙方均滿意并達成一致，簽訂技術服務合同。
5、開展實驗，按期完成合同規定的內容。
6、結題，提供實驗原始結果和分析結果、實驗流程、實驗條件等等。
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