15522676233，13366620421
當前位置：北京百奧創新科技有限公司>>技術文章>>細胞侵襲實驗過程是怎么樣呢？
細胞侵襲發生在腫瘤細胞轉移的第一步，即腫瘤細胞在原位突破基底膜，那么細胞侵襲實驗過程是怎么樣呢？讓我們一起來了解一下吧！
一. 基質膠包被：
(a) 將基質膠置于冰中并在4℃融化，使用預冷的移液管或吸頭混合基質膠至均勻狀態。
(b) 在冰上，將基質膠用無血清培養液按照1:8的比例進行稀釋，例如取8µl基質膠加入64µl不含血清的培養液中，使用預冷的吸頭混合至均勻狀態。
注：常用的稀釋比例為1:4、1:6、1:8，可根據實驗具體情況調整稀釋比例。
(c) 取60µL上述混合溶液垂直加入細胞小室中，使其均勻平鋪在底部。
(d) 吸出未結合的基質膠。
(e) 加入100µl不含血清的培養液，將培養板置于37℃培養箱孵育30分鐘，進行水化。
(f) 去除小室中液體，檢查是否有液體穿過小室進入到下室中，若沒有，則可用于接種細胞。
二. 細胞懸液的制備：
(a) 對細胞進行12-24小時的饑餓處理。（非必需步驟）
(b) 消化細胞，用不含血清的培養液重懸，調整細胞密度為5-50萬個/mL。
三. 細胞接種：
(a) 取500µL含10% FBS的培養液加入24孔板下室，用鑷子將細胞小室置于24孔板內。
(b) 取200µL細胞懸液加入細胞小室。
(c) 將24孔板置于培養箱中培養24-48小時。
四. 細胞固定、染色：
(a) 取出細胞小室，去除培養液，用棉簽輕輕擦拭基質膠及細胞。
(b) 在24孔板干凈的孔中加入600µl 4%多聚甲醛固定液，將小室放入固定20-30分鐘。
(c) 棄固定液，PBS洗滌小室1次。
(d) 在24孔板干凈的孔中加入適量結晶紫染色液，將小室放入染色5-10分鐘。
(e) 取出小室，PBS洗滌3次。
(f) 適當風干后，顯微鏡下觀察并計數。
更多關于細胞侵襲實驗過程的細節問題，歡迎大家給小編留言哦~
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供，信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責，儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示：為規避購買風險，建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。
