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我們在做WB實驗中抗體的有效保存可以提高實驗成功的概率。例如不同的抗體對其保存溫度有不同的要求,當我們發現一個WB實驗竟然被卡了一周,究其原因是抗體失效了。原來是將應該存放于-20℃的抗體放在了4℃冰箱里并保存了數月,固然抗體很不幸的失效了。看來是時候強調一下抗體保存條件的重要性了。抗體在適宜的條件下一般都可以保存幾個月至幾年。抗體的保存主要有三點值得需要注意的地方:保存的溫度、濃度和抗菌操作。那么今天我們先了解一下在WB實驗中,抗體應保存在什么溫度下?
大部分的抗體被分裝為小等份放在 -20 ℃ 或 -80 ℃ 下凍存是最佳的長期保存條件。在收到抗體后,暫時保存至4℃冰箱中也是可以的,短期保存時間為1-2周。也有一小部分抗體適合長期保存于4℃冰箱。
分裝前應先離心沉降掛在管壁和管蓋上的抗體,分裝量取決于您的實驗常用量,但建議不能少于10μl,以避免蒸發等帶來的干擾。分裝后的抗體試劑應盡量避免反復凍融,可短時間(1-2周)保存于4℃冰箱中。
抗體反復凍融可能使其變性,導致抗體形成聚集體,會使抗體的結合能力降低。對大部分抗體而言,在-20 ℃下保存就已足夠,在-80 ℃下保存并無明顯優勢。由于凍融循環(用于減少霜的形成)會造成抗體反復凍融而失活,所以在保存抗體時要避免使用無霜冰箱。
部分抗體試劑中會加入終濃度40%-50%的甘油使其在-20℃下保持溶液狀態,從而降低凍融損傷。此類抗體產品請勿儲存于-80℃冰箱中,否則仍會凝固。在此期間值得注意的是,加入甘油后的抗體容易被細菌污染,操作時應確保無菌。
以上就是在WB實驗中,抗體應保存在什么溫度下問題的全部解答內容,如果你有更多問題想咨詢可以給百奧創新留言哦~
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