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基礎(chǔ)液體培養(yǎng)基的常見問題

時間:2023/10/25閱讀:957
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細(xì)胞培養(yǎng)是人工模擬與創(chuàng)造細(xì)胞在體內(nèi)的生存環(huán)境,由此可見培養(yǎng)基成為了細(xì)胞在體外正常生長與增值的重要角色,在細(xì)胞培養(yǎng)實驗中我們會遇到各種各樣的問題,一起來看一下基礎(chǔ)液體培養(yǎng)基的常見問題有哪些吧?

基礎(chǔ)培養(yǎng)基.png

問題一:液體培養(yǎng)基為什么顏色不一樣?

答:酚紅加量不同,導(dǎo)致顏色差異:DMEM >MEM > DMEM/F12 > RPMI1640>F12 & F10。

問題二:培養(yǎng)基放冰箱里顏色變深?

答:空氣中CO2濃度低,培養(yǎng)基內(nèi)CO2會逐漸溢出,HCO3-減少,造成培養(yǎng)基偏堿。

問題三:含有谷氨酰an培養(yǎng)基地保存條件?

答:谷氨酰an對溫度敏感,溫度越高降解速度越快。谷氨酰an在溶液中不穩(wěn)定,單獨保存應(yīng)置于-20℃冰箱中。加有谷氨酰an的液體培養(yǎng)基應(yīng)存放在2°C–8°C,或者購買不含谷氨酰an的培養(yǎng)基使用時添加。

問題四:液體培養(yǎng)基可以放-20℃及以下保存嗎?

答:不可以。在-20℃下,培養(yǎng)基中的鹽容易析出,培養(yǎng)基融化后,有些鹽無法重新溶解,從而導(dǎo)致滲透壓降低。液體培養(yǎng)基放在2-8℃長期保存。液體培養(yǎng)基保存要避光。培養(yǎng)基中的某些成分遇光會產(chǎn)生過氧化氫,具有細(xì)胞毒性。

問題五:購買的液體培養(yǎng)基可以保存多久?

答:理論上只要保存得當(dāng),保質(zhì)期范圍之內(nèi)都可以用。但實際開瓶后保存時間過長會導(dǎo)致液體培養(yǎng)基中鹽分的析出和pH值的改變,因此建議開瓶后盡快用完。

問題六:更換培養(yǎng)基后細(xì)胞長不好?

(1)各廠家培養(yǎng)基配方不相同,可能細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)當(dāng)前的培養(yǎng)體系;

(2)原代細(xì)胞更容易適應(yīng)新的培養(yǎng)基,而傳代細(xì)胞系更換比較難;

(3)剛復(fù)蘇的細(xì)胞不要用來適應(yīng)新培養(yǎng)基,細(xì)胞活率低,待狀態(tài)穩(wěn)定后再用來馴化;

(4)敏感性細(xì)胞適應(yīng)培養(yǎng)基,需要多馴化幾代,期間細(xì)胞死亡數(shù)量減少,生長緩慢是正常現(xiàn)象。

問題七:DPBS和PBS有什么區(qū)別,能通用嗎?

答:都屬于磷酸鹽緩沖液,成分上只有一點點磷酸鹽的含量差異,均有等滲和調(diào)節(jié)pH的功能,大多數(shù)對于細(xì)胞的使用上可以通用。

問題八:HBSS 和PBS/DPBS有什么區(qū)別?

答:HBSS緩沖液中鹽成分較PBS和DPBS更復(fù)雜,且含有葡萄糖,可為細(xì)胞提供簡單的營養(yǎng),而PBS/DPBS不能提供營養(yǎng)。

以上就是基礎(chǔ)液體培養(yǎng)基的常見問題解答,如果你想了解更多請咨詢百奧創(chuàng)新客服哦。

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