一． 污染的防止

       進行PCR操作時，操作人員應當嚴格遵守一些操作規程，zui大程度地下降也許呈現的PCR污染或根絕污染的呈現。

      （一）區分操作區：當前，一般PCR尚不能做到單人單管，乾蕓GENIN PCRroom-1st操作臺PCR操作箱完成*閉管操作，但無論是不是能夠到達單人單管，均要求試驗操作在三個不一樣的區域內進行，PCR的前處理和后處理要在不一樣的阻隔區內進行：

1. 標本處理區，包含擴增摸板的制備；

2. PCR擴增區，包含反響液的制造和PCR擴增；

3. 產品剖析區，凝膠電泳剖析，產品攝影及重組克隆的制備。

各作業區要有必定的阻隔，操作器件，要有必定的方向性。如：標本制備→PCR擴增→產品剖析→產品處理。

牢記：產品剖析區的產品及器件不要拿到其他兩個作業區。

      （二）分裝試劑：PCR擴增所需求的試劑均應在裝有紫外燈的超凈作業臺或負壓作業臺制造和分裝。一切的加樣器和吸頭需固定放于其間，不能用來吸取擴增后的DNA和其他來源的DNA：

1． PCR用水應為高壓的雙蒸水；

2． 引物和dNTP用高壓的雙蒸水在無PCR擴增產品區制造；

3． 引物和dNTP應分裝貯存，分裝時應標明時刻，以備發作污染時查找緣由。

      (三) 試驗操作留意事項 盡管擴增序列的殘留污染大多數是假陽性反響的緣由，樣品間的穿插污染也是緣由之一。因而，不只要在進行擴增反響是慎重認真，在樣品的搜集、乾蕓GENIN PCRroom-1st操作臺PCR操作箱抽提和擴增的一切環節都應當留意：

1. 戴一次性手套，若不當心濺上反響液，當即更換手套；

2. 運用一次性吸頭，禁止與PCR產品剖析室的吸頭混用，吸頭不要長時刻露出于空氣中，防止氣溶膠的污染；

3. 防止反響液飛濺，翻開反響管時為防止此種情況，開蓋前稍離心搜集液體于管底。若不當心濺到手套或桌面上，應馬上更換手套并用稀酸擦洗桌面；

4. 操作多份樣品時，制備反響混合液，先將dNTP、乾蕓GENIN PCRroom-1st操作臺PCR操作箱緩沖液、引物和酶混合好，然后分裝，這樣即能夠削減操作，防止污染，又能夠增加反響的度；

5. zui終參加反響模板，參加后蓋緊反響管；

6. 操作時建立陰陽性對照和空白對照，即可驗證PCR反響的可靠性，又能夠幫忙判別擴增體系的可信性；

7. 盡也許用可更換或可高壓處理的加樣器，因為加樣器zui簡單受產品氣溶膠或標本DNA的污染，*運用可更換或高壓處理的加樣器。如沒有這種特別的加樣器，乾蕓GENIN PCRroom-1st操作臺PCR操作箱至少PCR操作過程中加樣器應當，不能穿插運用，尤其是PCR產品剖析所用加樣器不能拿到其它兩個區；

8. 重復試驗，驗證結果，慎下結論。

      （四）選擇質量好的乾蕓GENIN PCRroom-1st操作臺PCR操作箱，以防止樣本外溢及外來核酸的進入，翻開離心管前應先離心，將管壁及管蓋上的液體甩至管底部。開管動作要輕，以防管內液體濺起。

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