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PCNA核內參抗體WB實驗的內參解決方案

來源:武漢艾美捷科技   2016年12月14日 17:00  

 增殖細胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen簡稱PCNA)由Miyachi等于1978年在 SLE(系統性紅斑狼瘡)患者的血清中發現并命名,因其只存在于正常增殖細胞及腫瘤細胞內而得名。PCNA是一種分子量為36KD的蛋白質,在細胞核內合成,并存在于細胞核內,為DNA聚合酶的輔助蛋白。由于其在細胞核內穩定表達,因此其抗體被廣泛應用于細胞核蛋白的內參抗體。

如何選擇合適的細胞核內參抗體

常用的細胞總蛋白質內參有GAPDH和細胞骨架蛋白β-Actin或β-Tubulin等。對于一些植物的樣本,則需要特別的植物Actin蛋白作為內參。當實驗樣品中只是核蛋白,而不是細胞總蛋白提取液時,可以用組蛋白H(Histone H),或者增殖細胞核抗原(PCNA)等為核內參抗體。除了這些,其它常見的核蛋白內參還有K70, K80, Lamin A和B,在一些文獻報道中,Erk2、TATA binding protein(TBP)以及c-Jun、c-Fos等都有使用。但是需要注意的問題是核蛋白內參的選擇需要考慮實際的試驗環境,比如在涉及細胞增殖相關試驗中,c-Jun由于自身表達變化就不適合做內參;而在凋亡實驗時,TBP、Lamin等也不適合作為內參。

另外,我們還需要根據目的蛋白的大小選擇合適的核內參,我們推薦內參要與檢測的目的蛋白的分 子量相差5KD以上,因此你需要根據你目的檢測蛋白的分子量來選擇合適的內參。PCNA的檢測分子量大約在28kD,而Histone H3的檢測條帶大約在18kD,因此PCNA比較適合用于檢測目標蛋白在較大的WB實驗,而Histone H3則不適合用于13kD-23kD大小的目的蛋白內參。另外,雖然PCNA是zui合適的核內參抗體之一,但是在某些條件下,一些影響增殖的因素會導致樣品間PCNA含量的變化,就不適合作為內參。

一開始購買Abbkine的PCNA抗體是用來做WB的,效價挺高的。后來我們使用了組織塊作為樣品做共定位,我嘗試使用該抗體對PCNA做定位,做免疫組織化學,WB和IHC效果都很不錯。——中南民族大學生科院一客戶

 
產品名稱及描述品牌貨號產品說明
Anti-PCNA Mouse Monoclonal Antibody (1D7)AbbkineA01040詳情

 

另外,我們還需要考慮自己的需要,特別是實驗應用上的需要。一般來說,應用類型越多,在使用過程中的選擇余地就越大,而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩定性以及效價都要優于多克隆抗體。 另外,抗體的效價也是考察該抗體性價比的重要方面,也即相當于實際應用時的稀釋比率。一個效價高的100μl PCNA抗體(假如其WB檢測的稀釋比率是1:5000,zui終使用液相當于500ml),要比效價低的1ml的PCNA抗體(假如WB檢測的稀釋比率是 1:200,zui終使用液相當于2ml)性價比更高。因此在選擇抗體的時候,不但需要考慮抗體的量,還需要考慮抗體的效價,即不同應用的建議稀釋比率。

為什么選擇推薦Abbkine品牌的PCNA抗體?

供應PCNA抗體的品牌是比較多的,象Abcam、Santa Cruz、Cell Signaling、Sigma,甚至于Millipore、R&D、Novus、BD等都有相應的產品。下面是幾個進口品牌的簡單比較:

品牌貨號2013年報價規格應用類型
ab29¥4418100µgWB, IP, IHC
2586S¥2997100μlWB, IF, IHC, FC
SAB2502099¥3299100μgWB, ELISA
A01040¥1800200μlWB, IHC

 

另外,一些國內的供貨商也能提供分裝的PCNA抗體,但是在品牌和質量保障上都有不足。國產分裝的PCNA抗體在質量穩定性上有不足,并且經過分裝以后,其效價也有損失。而原產于國內實驗室的PCNA抗體有些具有較好的檢測活性,但是在應用類型上有差距,并且在批次之間的穩定性上較難控制,而國內僅有的少量原產抗體也是多克隆抗體。如果您想買到一支性價比更高,同時也是*品牌的PCNA核內參抗體,那Abbkine可能會是您的一個重要考慮選項之一。我們向您推薦Abbkine的PCNA核內參抗體Anti-PCNA Monoclonal Antibody (1D7)(貨 號A01040)。

 
產品名稱及描述品牌貨號產品說明
Anti-PCNA Mouse Monoclonal Antibody (1D7)AbbkineA01040詳情

 

該抗體單克隆抗體,克隆號為1D7。其抗原為人PCNA蛋白中兼具特異性和保守的一段序列,可用于小鼠、人以及大鼠樣本的WB內參。另外,該抗體的效價非常高,WB實驗推薦稀釋比率為1:1000-1:10,000,甚至有客戶報告更高的稀釋比率。

幻燈顯示

 

點擊圖片查看Abbkine PCNA核內參抗體更詳細信息

 

該PCNA內參抗體免疫組織化學的效果也很不錯,是一款非常適合做免疫組化對細胞骨架進行染色定位的抗體產品。另外,也有客戶報告使用該抗體用于組織的熒光染色,也取得了意外的效果。

Abbkine還提供大包裝1ml以及更大規格定制的PCNA標簽抗體,非常適合經常進行內參驗證或校準的免疫學實驗需求。為方便客戶的使用, 上述產品,Abbkine均在中國備有現貨。Abbkine針對中國市場,提供化的產品質量追蹤和售后服務以及保障,如果您在使用過程中有任何問題, 請直接與其當地代理商艾美捷科技有限公司。

 
產品名稱及描述品牌貨號產品說明
Anti-PCNA Mouse Monoclonal Antibody (1D7)AbbkineA01040詳情

 

美國Abbkine品牌是一家提供高性價比免疫學和細胞學科研產品及解決方案的品牌,艾美捷將其引入中國,作為其中國區域代理,將為客戶提供性 價比的常規免疫學試劑,如各種標簽抗體、內參抗體、常規一抗以及全系列二抗,抗體檢測底物以及相關試劑盒等。同時我們作為多家品牌的的中國代理或 區域代理,艾美捷能為您提供系列的實驗室解決方案。如果您對上述產品感興趣,請致電免費客戶專線到艾美捷科技有限公司垂詢相關的產品信息及完整實驗解決方案。

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