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PCNA核內(nèi)參抗體使用指南

來源:武漢艾美捷科技   2017年04月27日 16:14  

 

 PCNA核內(nèi)參抗體,抗PCNA單抗,PCNA小鼠源單克隆抗體

 

    Anti-PCNA Mouse Monoclonal Antibody ( 1D7)

 

增殖細(xì)胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen簡稱PCNA)由Miyachi等于1978年在 SLE(系統(tǒng)性紅斑狼瘡)患者的血清中發(fā)現(xiàn)并命名,因其只存在于正常增殖細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞內(nèi)而得名。PCNA是一種分子量為36KD的蛋白質(zhì),在細(xì)胞核內(nèi)合成,并存在于細(xì)胞核內(nèi),為DNA聚合酶的輔助蛋白。由于其在細(xì)胞核內(nèi)穩(wěn)定表達(dá),因此其抗體被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞核蛋白的內(nèi)參抗體。

 

如何選擇合適的細(xì)胞核內(nèi)參抗體?

 

常用的細(xì)胞總蛋白質(zhì)內(nèi)參有GAPDH和細(xì)胞骨架蛋白β-Actin或β-Tubulin等。對于一些植物的樣本,則需要特別的植物Actin蛋白作為內(nèi)參。當(dāng)實(shí)驗(yàn)樣品中只是核蛋白,而不是細(xì)胞總蛋白提取液時(shí),可以用組蛋白H(Histone H),或者增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)等為核內(nèi)參抗體。除了這些,其它常見的核蛋白內(nèi)參還有K70, K80, Lamin A和B,在一些文獻(xiàn)報(bào)道中,Erk2、TATA binding protein(TBP)以及c-Jun、c-Fos等都有使用。但是需要注意的問題是核蛋白內(nèi)參的選擇需要考慮實(shí)際的試驗(yàn)環(huán)境,比如在涉及細(xì)胞增殖相關(guān)試驗(yàn)中,c-Jun由于自身表達(dá)變化就不適合做內(nèi)參;而在凋亡實(shí)驗(yàn)時(shí),TBP、Lamin等也不適合作為內(nèi)參。

 

應(yīng)用類型:WB(1:1000-1:5,000)、IHC(1:100-1:500)

 

Fig.1.Immunohistochemistry staining (1:100) of Human breast cancer tissue paraffin-embedded with Anti-PCNA mouse monoclonal antibody (1D7).

Fig.2.Western blot analysis (1:2,000) of PCNA expression in Rat brain (lane A), A549 cell (lane B), NIH 3T3 cell (lane C) and 293T cell (lane D) with Anti-PCNA mouse monoclonal antibody (1D7).

    免疫原:KLH偶聯(lián)的PCNA部分多肽序列

 

    來源宿主:小鼠

 

    反應(yīng)性:該P(yáng)CNA核內(nèi)參抗體可識別人、小鼠、大鼠等種屬的PCNA蛋白。

 

    保存建議:在發(fā)貨后能在-20℃保存1年。為zui大限度的避免損失,請?jiān)诖蜷_管蓋之前融化抗體并離心。我們建議使用前分裝以避免反復(fù)凍融,分裝后可在4℃保存1個(gè)月。

 

    背景資料:增殖細(xì)胞核抗原( Proliferating Cell Nuclear Antigen簡稱PCNA)由Miyachi等于1978年在 SLE( 系統(tǒng)性紅斑狼瘡)患者的血清中發(fā)現(xiàn)并命名,因其只存在于正常增殖細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞內(nèi)而得名。PCNA是一種分子量為36KD的蛋白質(zhì),在細(xì)胞核內(nèi)合成,并存在于細(xì)胞核內(nèi),為DNA聚合酶的輔助蛋白。由于其在細(xì)胞核內(nèi)穩(wěn)定表達(dá),因此其抗體被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞核蛋白的內(nèi)參抗體。

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