日韩毛片在线视频-日韩毛片在线影视-日韩美aaa特级毛片-日韩美a一级毛片-久久夜夜操妹子-久久夜夜肉肉热热日日

產品推薦:水表|流量計|壓力變送器|熱電偶|液位計|冷熱沖擊試驗箱|水質分析|光譜儀|試驗機|試驗箱


儀表網>技術中心>行業論文>正文

歡迎聯系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

人源細胞培養操作規程

來源:上海莼試生物技術有限公司   2018年04月12日 14:46  

人源細胞處于未分化狀態:ES細胞培養用含有ESGRO(白血病抑制因子)的高糖培養基來阻止細胞的分化。為細胞提供包被有0.1%明膠的平板作為粘附細胞的基質。建議每2-3天從達到80%-90%融合的平板按1:8的比率傳代細胞一次,細胞傳代以后,在將細胞接種在0.1%明膠包被的培養皿之前,通過預先將細胞接種在沒有經過包被的組織培養板2個小時,使分化細胞粘附,從而將分化和未分化細胞分開。將細胞全程置于37℃,5%CO2,100%濕度條件下培養。
培養基:ES:配制一20×不含DMEM,HS,ESGRO的溶液(該溶液也能用于EB培養基--見下文)。分裝在50ml FALCON管中,(稀釋為2×,每管42ml),貯存在-20℃。通過將21ml該溶液,HS和ESGRO加入450mlDMEM中制備培養基,0.2μm濾膜過濾。貯存于4℃。
注:一瓶DMEM是500ml。
貯存液:DMEM(高糖)、馬血清(HS)、L-*(200mM)、MEM NEAA(10mM)、HEPES(1M)、β-巰基乙醇(55Mm)、PEST、ESGRO。

復蘇細胞:細胞被凍存在10%二甲基亞砜(DMSO)中防止結晶的形成,結晶的形成會損害細胞。然而,二甲基亞砜對細胞有毒性,快速的進行細胞復蘇是很重要的。
操作步驟:
1.從液氮中取出一管細胞;
2.將凍存管置于37℃水浴中2分鐘(或放到管內溶液恰好*溶解);
3.將細胞轉移到一15ml Falcon管中;
4.加入5ml ES培養基(用培養基沖洗凍存管);
5.離心3分鐘;
6.棄上清,用2ml ES培養基重懸細胞,至少吹打10次;
7.接種在明膠包被(見下文)的6孔或6cm組織培養皿;
8.孵育。
凍存細胞
人源細胞凍存液:90%HS和10%二甲基亞砜
步驟:
1.1×PBS洗細胞并留少許PBS在培養皿內;
2.用細胞刀收集細胞;
3.將細胞轉入15ml Falcon管內并離心3分鐘;
4.棄去上清并將細胞重懸于冷的凍存液中(10cm的培養皿用2ml,15cm的培養皿用6-7ml。)
5.分裝于凍存管內,每管1ml;
6.置-80℃過第二天移入液氮。
"分子式: C27H30O15 
分子量:594.52 "    Oroxin B    20mg/支    木蝴蝶苷B
94079-81-9    Poliumoside    20mg/支    金石蠶苷
"分子式:C34H44O19 
分子量:756.70 "    Forsythoside B    20mg/支    連翹酯苷B
1957/10/3    Palmitic acid    20mg/支    棕櫚酸
104112-82-5    Phellodendrine chloride    10mg/支    鹽酸黃柏堿
2141/9/5    Magnoflorine iodide    10mg/支    碘化木蘭花堿
136997-64-3    (-)-Syringaresnol-4-O-β-D-apiofuranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside    10mg/支    (-)-丁香樹脂酚-4-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷
110703-200726    含量測定    20mg    人參皂苷Rgl
人源細胞

 

免責聲明

  • 凡本網注明“來源:儀表網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-儀表網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:儀表網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
  • 本網轉載并注明自其它來源(非儀表網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點或和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。
聯系我們

客服熱線: 15024464426

加盟熱線: 15024464426

媒體合作: 0571-87759945

投訴熱線: 0571-87759942

關注我們
  • 下載儀表站APP

  • Ybzhan手機版

  • Ybzhan公眾號

  • Ybzhan小程序

企業未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87759942
主站蜘蛛池模板: 欧美a一级 | 国产精品1234区 | 看全色黄大色大片免费久久久 | 日韩欧美综合 | 欧美人视频在线观看视频 | 白丝挠脚心tk调教vk | 亚洲综合色一区 | 免费观看亚洲视频 | 99爱在线视频这里只有精品 | 成年看片免费高清观看 | 大色综合色综合网站 | free性video另类重口 | 国内精品综合九九久久精品 | 亚洲人成一区二区不卡 | 新有菜在线 | 亚洲第一页在线 | 国产精品欧美日韩 | 最新亚洲一区二区三区四区 | 亚洲成人黄色网址 | 国产网曝手机视频在线观看 | 日韩视频中文字幕专区 | 在线小视频你懂的 | 欧美日韩在线播放一区二区三区 | 在线免费观看黄色小视频 | 成年人在线免费网站 | 亚洲好色网 | 青草视频在线 | 国产成人精品一区二区三在线观看 | 日韩伦理一区二区三区 | 色avv | 久久9精品| 久久高清一级毛片 | 伊人久艹 | 黄色片黄色片黄色片黄色片黄色片 | ww亚洲ww在线观看国产 | 成人影院在线观看视频 | 免看一级一片一在线看 | 成人自拍网站 | 男人女人日皮视频 | 爱呦视频在线播放网址 | 欧美一级高清视频在线播放 |