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“人白細(xì)胞介素12(IL-12P40)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)”作為上海琛藝本期特別推出的*,!
我司專(zhuān)業(yè)經(jīng)銷(xiāo)生命科學(xué)領(lǐng)域的品牌ELISA試劑盒等相關(guān)產(chǎn)品,保障產(chǎn)品,種類(lèi)齊全及充足的貨源為顧客提供更多的選擇,期待您的咨詢(xún)!
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T 48T
【檢測(cè)方法】:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
【待檢樣本】:體液,血清,血漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液,尿液,組織勻漿,心房水標(biāo)本等等。
【保存條件】:2-8℃
【供 貨 期】:3-5天
【銷(xiāo)售優(yōu)勢(shì)】:量大從優(yōu)、質(zhì)量保證、如果質(zhì)量問(wèn)題包退換、含稅含運(yùn)費(fèi)。
【運(yùn)輸條件】:低溫運(yùn)輸,用干冰或者冰袋低溫運(yùn)輸。
應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本水平。用純化抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入,再與HRP標(biāo)記抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品濃度。
““人白細(xì)胞介素12(IL-12P40)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)”實(shí)驗(yàn)中的封閉
·ELISA實(shí)驗(yàn)中,蔗糖本身沒(méi)有封閉作用。
·封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。
·加蔗糖的主要目的是保護(hù)ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保護(hù)劑”的作用。
·蔗糖溶液一般在ELISA板子經(jīng)過(guò)BSA封閉后加,當(dāng)然也有將蔗糖加到封閉液中同時(shí)進(jìn)行處理。
上海琛藝實(shí)業(yè)為您整理的使用手冊(cè)內(nèi)容:
1. 分裝前需確定NAA、6-BA沒(méi)有出現(xiàn)沉淀每一批次都必須做預(yù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè);
1. 所用分裝用離心管均用進(jìn)口無(wú)菌的;
2. 分裝前,需要對(duì)吸頭進(jìn)行滅菌;
3. 需要在在超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行分裝。
Elisa試劑盒*特點(diǎn):
1. 靈敏,準(zhǔn)確和一致的性能;
2. 用血清、血漿、組織培養(yǎng)上清或裂解產(chǎn)物進(jìn)行過(guò)驗(yàn)證;
3. 在半天內(nèi)可完成的現(xiàn)成、方便的檢測(cè)。
對(duì)于含多個(gè)抗原決定簇的大分子蛋白,使用雙抗體夾心““人白細(xì)胞介素12(IL-12P40)ELISA試劑盒模式測(cè)定相當(dāng)簡(jiǎn)便,現(xiàn)有的商品試劑盒基本上都采用此種測(cè)定模式。具體測(cè)定方法如下:
1.首先以雙抗體之一于碳酸鹽緩沖液中4℃下放置一個(gè)晚上包被聚苯乙烯等固相,形成固相抗體,洗滌去除未與固相結(jié)合或結(jié)合不緊的抗體后,用小牛血清或牛血清白蛋白等封閉,洗滌去除未結(jié)合的部分及雜質(zhì)。
2.加入含待測(cè)物的臨床樣本如血清等,溫育一定時(shí)間后洗板;此時(shí),待測(cè)抗原就會(huì)與固相上特異抗體反應(yīng)而吸附于固相上。
3.加入酶標(biāo)記的雙抗體之二,溫育一定時(shí)間后洗板;此時(shí),在固相上即形成雙抗體與特異抗原的夾心產(chǎn)物。
4.加入酶底物,溫育顯色測(cè)定。
我公司提供“”免費(fèi)代測(cè)服務(wù),5個(gè)工作日出結(jié)果,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中我司提供全程技術(shù)指導(dǎo),有任何技術(shù)問(wèn)題都可以。
ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中,通過(guò)不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法(圖a)、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
◇ elisa試劑盒注意事項(xiàng):
收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),-20℃可保存1個(gè)月。-70度可保存6個(gè)月。部分激素類(lèi)標(biāo)本需添加*。
◇ 液體類(lèi)標(biāo)本
標(biāo)本必須為液體,不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個(gè)標(biāo)本量收集體積=100ul×檢測(cè)種類(lèi)。取材前須向銷(xiāo)售人員索要說(shuō)明書(shū)。
◇ 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。收集上清。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
◇ 血漿:
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入10%(v )抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1%heparin或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
◇ 尿液、胸腹水、腦脊液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
◇ 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
◇ 組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin(*)。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清置于-20度或-70度保存,如有必要,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
人(Human) 大鼠(Rat) 小鼠(Mouse) 猴(Monkey) 兔(Rabbit) 豬(Pig) 馬(Horse)
“ ”適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本,靈敏度*。我們保證對(duì)所售任何產(chǎn)品一概負(fù)責(zé)到
底,每一份實(shí)驗(yàn)結(jié)果都真實(shí)可靠。
相關(guān)產(chǎn)品
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