厭氧培養(yǎng)箱操作規(guī)程如下：

一、操作室厭氧環(huán)境形成

1. 按使用要求放置好必要的配件和器具，并向操作室內(nèi)放入二個無毒塑料袋。

2. 通電源開照明燈，開控溫儀，調(diào)節(jié)所需溫度及安全溫度。

3. 操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉)。

4. 關(guān)緊取樣室內(nèi)外門，并抽真空校驗。

5. 操作室內(nèi)置換(氮氣置換) :

(1)先用橡皮管插入操作室內(nèi)進氣口，另一頭插入塑料袋。

(2)接通氮氣進氣路，打開氮氣控制閥，使二只塑料袋充足氮氣，然后扎緊袋
口。

(3)把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。

(4)把塑料袋內(nèi)氮氣漸漸地放于操作室內(nèi)，至全部放出。

6.操作室第二次置換(氮氣置換)重復(fù)一次充
氮過程，并注意隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣。

7. 操作室第三次置換(混合氣體置換) : (混合氣體配為:N2:H2:C02=85%:10%:5%)(1) 調(diào)換氣路打開混合氣

道通閥門進氣，充氣時要隨時腳踏開關(guān)開閉排氣。

(2) 混合氣充滿塑料袋后，關(guān)掉混合氣直通閥(三通閥)，使混合氣經(jīng)過流量計輸入操作并調(diào)整流里計，流量為每分鐘10毫升左右。

(3) 把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi)。

(4) 通過三次換氣后，操作室內(nèi)氣體含氧里已處于極微量狀態(tài)。

8. 操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑，接通除氧催化器電源進行催化除氧，- -小時后打開美蘭指示劑(美蘭安瓶)觀察其變**況，不變色為操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境。

9.開紫外線燈，室內(nèi)進行處理。**時間自定。厭氧培養(yǎng)箱操作規(guī)范和技術(shù)參數(shù)。
二、菌種的置入和培養(yǎng)1.檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊。

2.打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門。

3.取樣室充氮置換三次過程:先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停,然后人工打開氮氣閥門進氣,使指針回復(fù)零位后進行下次操作。

4. 如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù)。

5. 取樣室內(nèi)外門開
啟，關(guān)緊要抽低真空度100毫米汞柱(13Kpa)檢驗及幫助操作。

6. 厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件:

(1) 每天在操作室內(nèi)打開美蘭指示劑觀察，正常情況下使用。如不正常就必須重新?lián)Q氣。

(2)要長期連續(xù)輸入微童的混合氣體，使補進的氫氣能和微里的氧結(jié)合通過催化吸收，保證了室內(nèi)厭氧狀態(tài)，補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。

(3) 連續(xù)培養(yǎng)運行一天，更換一次除氧劑和干燥劑。

7.接種棒**器的應(yīng)用:

(1) 隨時用鎳鉻電熱絲使電極短路而變赤熱以進行 (接種棒)

(2) 熔蠟處可直接放上，試管封蠟口旋轉(zhuǎn)熔蠟。

8. 操作室里的培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度可任意選擇和控制。

9. 混合氣瓶、氮氣瓶輸出壓力調(diào)整:
調(diào)節(jié)減壓閥，使輸出壓力為0. 1Mpa左右。