紫外可見分光光度計(jì)作為一種常見的分析儀器廣泛地應(yīng)用在制藥、環(huán)保等行業(yè)，成為化學(xué)分析中的重要工具。無論是物質(zhì)的定性分析，還是定量分析,此類儀器的波長準(zhǔn)確與否直接影響到結(jié)論的準(zhǔn)確。在儀器的運(yùn)輸和搬動(dòng)過程中，內(nèi)置的分色濾光片和波長調(diào)整裝置均有可能會(huì)發(fā)生位置變動(dòng)，導(dǎo)致波長偏移，因此、分光光度計(jì)波長檢定很有必要。JJG178 — 2007《紫外、可見、近紅外分光光度計(jì)檢定規(guī)程》對標(biāo)準(zhǔn)器的選擇有具體的要求。

分光光度計(jì)檢定波長的工作原理

分光光度計(jì)光源發(fā)出的光線通過單色器后變成有一定狹窄帶寬的單色光，單色光通過安置在比色槽中的波長標(biāo)準(zhǔn)器后，標(biāo)準(zhǔn)器對光線有吸收作用，顯示系統(tǒng)就會(huì)顯示一定的透射比（或吸光度），當(dāng)單色光波長與波長標(biāo)準(zhǔn)器的特征波長一致時(shí)，此時(shí)標(biāo)準(zhǔn)器對光線的吸收低，在透射比模式下,對于單峰圖譜，此時(shí)顯示透射比為大，形成尖銳的單峰，對于多峰圖譜會(huì)形成一組系列的波峰或波谷。通過讀取峰值對應(yīng)的波長值就能得到標(biāo)準(zhǔn)值在儀器上對應(yīng)的波長示值。

分光光度計(jì)工作波長的劃分及計(jì)量性能要求

依據(jù)JJG178 —2007分光光度計(jì)工作波長的劃分為3段,分別是A段（紫外光區(qū)），范圍為190?340nm；B段（可見光區(qū)段），范圍為40?900nm；C段（近紅外光區(qū)），范圍為900?2600nm,分光光度計(jì)工作波長計(jì)量性能要求見表1。

常見檢定波長用濾波片指標(biāo)及適用范圍

目前,可獲得的檢定波長用標(biāo)準(zhǔn)器、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)器選型的三分之一原則確定的適用范圍見表20通過表1、表2可知，如果要使用上述濾波片檢定更高級別的儀器，需選擇更高能力的機(jī)構(gòu)標(biāo)定濾光片，以減小標(biāo)定數(shù)據(jù)的不確定度。事實(shí)上、濾光片的檢定均使用I級可見紫外分光光度計(jì)，而I級可見紫外分光光度計(jì)的MPE= 土0?3（A段）、MPE= ±0?5（B段）。另外,受濾光片波長帶寬較寬的限制，期待減小標(biāo)定數(shù)據(jù)的不確定度來提升檢定能力并不可行。要想提高檢測能力，只能采用不確定度值更小的氧化鈥溶液波長標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

氧化鈥溶液波長標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)指標(biāo)及適用范圍

目前、可獲得的檢定波長用標(biāo)準(zhǔn)溶液有以下兩種，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)器選型的三分之一原則確定適用范圍見表3。

檢定波長用標(biāo)準(zhǔn)器的選擇

檢定波長用標(biāo)準(zhǔn)器的選擇須考慮待選標(biāo)準(zhǔn)器的峰值的分布范圍、標(biāo)定數(shù)據(jù)的不確定度，以此確定能檢定分光光度計(jì)的級別。JJG178 — 2007《紫外、可見、近紅外分光光度計(jì)檢定規(guī)程》對波長標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的選擇已有具體的規(guī)定，現(xiàn)就從實(shí)際工作中的情況和可操作性方面分析檢定波長用標(biāo)準(zhǔn)器的選擇。

介質(zhì)膜干涉濾光片光譜為單峰波形適合檢定手動(dòng)調(diào)節(jié)波長的分光光度計(jì)，錯(cuò)放濾波片、氧化鈥濾波片光譜均為多峰波形適合檢定自動(dòng)掃描波長的分光光度計(jì)。在實(shí)際工作中、可見分光光度計(jì)都是手動(dòng)調(diào)節(jié)波長，且等級均為III、IV,紫外-可見分光光度計(jì)手動(dòng)調(diào)節(jié)波長、自動(dòng)掃描波長兩種方式都存在。因此、檢定可見分光光度計(jì)時(shí)，使用介質(zhì)膜干涉濾光片，使用錯(cuò)錢濾波片可操作性較差。檢定手動(dòng)調(diào)節(jié)波長紫外-可見分光光度計(jì)時(shí),可使用介質(zhì)膜干涉濾光片檢定B段，氧化鈥濾波片檢定A段，不考慮操作性差這一因素，也可以只使用氧化鈥濾波片檢定A段、B段。檢定自動(dòng)掃描波長紫外-可見分光光度計(jì)時(shí)，同時(shí)使用氧化鈥濾波片、錯(cuò)錢濾波片可測得240?820nm范圍內(nèi)的峰值點(diǎn)，彌補(bǔ)了單獨(dú)使用氧化鈥濾波片只能測得240?640nm范圍的峰值點(diǎn)，所測波長范圍較短的缺陷，比較符合JJG178-2007中要求每隔100nm至少選擇一個(gè)波長檢定點(diǎn)的要求。

另外、在選擇介質(zhì)膜干涉濾光片時(shí)，需注意波長半寬<lOnm、峰值透射比〉50%。介質(zhì)膜干涉濾光片的性能指標(biāo)隨著時(shí)間會(huì)變差，波長半寬變長、峰值透射比變低。氧化鈥溶液波長標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)光錯(cuò)為多峰譜圖，雖然可以用于各個(gè)級別的可見紫外分光光度計(jì)檢定，但從經(jīng)濟(jì)和可操作性角度考慮，一般用于i、n級的紫外-可見分光光度計(jì)檢定。

結(jié)論

檢定波長用標(biāo)準(zhǔn)器的選擇，應(yīng)當(dāng)遵循適用、方便、經(jīng)濟(jì)的原則，根據(jù)本單位檢定校準(zhǔn)市場需求確定標(biāo)準(zhǔn)器。