計數辦法的驗證當樹立產品的微生物限度儀查看法時，應進行檢定、霉菌及酵母菌計數辦法的驗證，以確認所選用的辦法適合于該產品、霉菌及酵母菌數的測定。若產品的組分或原查驗條件產生改動或許影響查驗成果時，計數辦法應重新驗證。驗證時，按供試液的制備、霉菌及酵母菌計數所規矩的辦法及下列要求進行。對各實驗菌的收回率應逐個進行驗證。菌種及菌液制備同計數培養基的適用性查看驗證辦法驗證實驗至少應進行3次獨立的平行實驗，并分別計算各實驗菌每次實驗的收回率。

　　（1）實驗組 平皿法計數時，取實驗或許用的稀釋級供試液1ml 和50～100cfu 實驗菌，分別注入平皿中，立即傾瀉瓊脂培養基，每株實驗菌平行制備2個平皿，按平皿法測定其菌數。薄膜過濾法計數時，取規矩量實驗或許用的稀釋級供試液，過濾，沖刷，在一 次的沖刷液中參加50～100cfu 實驗菌，過濾，按薄膜過濾法測定其菌數。
　　（2）菌液組 測定所加的實驗菌數。
　　（3）供試品對照組 取規矩量供試液，按菌落計數辦法測定供試品本底菌數。
　　（4）稀釋劑對照組 若供試液制備需要渙散、乳化、中和、離心或薄膜過濾等特殊處理時，應添加稀釋劑對照組，以考察供試液制備過程中微生物受影響的程度。實驗時，可用相應的稀釋液代替供試品，參加實驗菌，使菌濃度為每1ml 供試液含50～100cfu，按實驗組的供試液制備辦法和菌落計數辦法測定其菌數。成果判別在3次獨立的平行實驗中，稀釋劑對照組的菌收回率（稀釋劑對照組的均勻菌落數占菌液組的均勻菌落數的百分率）應均不低于70%。若實驗組的菌收回率（實驗組的均勻菌落數減去供試品對照組的均勻菌落數的值占菌液組的均勻菌落數的百分率）均不低于70%，照該供試液制備辦法和計數法測定供試品、霉菌及酵母菌數；若任一 次實驗中實驗組的菌收回率低于70%，應選用培養基稀釋法、離心沉淀法、薄膜過濾法、中和法等辦法或聯合使用這些辦法消除供試品的抑菌活性，偏重新進行辦法驗證。
　　若沒有適合的辦法消除供試品中的抑菌作用，那么驗證實驗中微生物收回的失利可看成是因供試品的活性引起的，同時表明該供試品不能被實驗菌污染。可是，供試品也或許僅對實驗用菌株具有抑制作用，而對其他菌株沒有抑制作用。因此，依據供試品須契合的微生物限度儀規范和菌數報告規矩，在不影響查驗成果判別的前提下，應選用能使微生物成長的更高稀釋級的供試液進行辦法驗證實驗。若驗證實驗契合要求，應以該稀釋級供試液作為稀釋級的供試液進行供試品查驗。計數辦法驗證時，選用上述辦法若還存在一株或多株實驗菌的收回率達不到要求，那么挑選收回情況，挨近要求的辦法和實驗條件進行供試品的查驗。