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尼康 CSU-W1 SoRa 超高分辨率轉盤共聚焦顯微鏡

來源:北京恒三江儀器銷售有限公司   2024年09月12日 08:46  

繼推出 Yokogawa CSU 系列轉盤共聚焦成像系統 CSU-X1 和 CSU-W1 后,為進一步滿足市場需求,尼康現隆重推出 CSU-W1 SoRa 超分辨轉盤共聚焦。相比于 CSU-X1 的成像速度快(2000 fps, 10 mm X 7 mm)和 CSU-W1 的大視野成像 (17 mm X 16 mm, 200 fps), CSU-W1 SoRa   則是在CSU-W1的基礎上實現快速超分辨成像, 可達到約 120 nm 的XY 分辨率。


『約 120 nm 的 XY 分辨率』

通過使用放大變倍和微透鏡, XY 分辨率突破了光學限制,是常規共聚焦顯微鏡的1.4 倍。進一步去卷積,可以提高到常規共聚焦分辨率的2 倍

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▲比較明場圖片、SoRa 原圖片(約有1.4x分辨率的提高)和反卷積 SoRa 圖片(約有2x分辨率的提高)


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▲NG108 細胞生長錐,圖像由國家工業科學技術研究所生物醫學研究所Kaoru Kato 博士提供


『光學像素重新分配』

不依賴于特殊處理和計算,任何樣品都可以在 CSU- W1 SoRa 成像系統上達到光學上的超分辨圖像。這使得圖像的采集僅受樣品的信噪比和檢測器的曝光時間的限制。CSU-W1 SoRa 使更快的超分辨成像成為可能。

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共聚焦顯微鏡圖像是由照明 PSF (Point spread function, 點擴散函數) 和探測 PSF 共同作用形成的。考查針孔平面上距離光軸位置 D 處的圖像,我們可以把它表示成照明光的 PSF 和探測器 PSF 的乘積(如上圖所示)。


可以看到,其主要貢獻是來自距離光軸 D/2 位置處的標本信號。也就是說,實際上距光源中心 D/2 位置處的信息被水平放大,對應于距針孔中心 D 位置處被檢測到。為了校正這一現象,我們在每個針孔前安裝了一個微透鏡,通過微透鏡,單個點在針孔上的發散角減小了 2   倍,模仿了無限小的理想針孔效果,但不會影響信號亮度。【參考文獻】

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▲明場圖片、50um 小孔轉盤共聚圖片、SoRa 轉盤原圖片和反卷積 SoRa 轉盤圖片比較

『集共聚焦成像和超分辨成像一體』

CSU-W1 SoRa 系統包括兩個轉盤碟片,由軟件控制方便切換:一個具備光學切片深度成像能力的超分辨碟片和一個標準的共聚焦成像碟片。這意味著CSU-W1 SoRa 同時具備共聚焦轉盤成像系統和共聚焦超分辨系統。

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『尼康高品質物鏡』

為了實現的分辨率,SoRa 需要 60 x 和 100 x 物鏡,并采用2.8 x 變倍率(100 x)和 4 x 變倍率( 60 x ),以提供有效的像素尺寸,實現超分辨和反卷積。尼康開發了的 60 x 和 100 x 物鏡具有長工作距離、高數值孔徑和矯正環,這些高品質物鏡是對 SoRa 成像系統的補充。其中,尼康 Ti2-E 倒置顯微鏡可搭配電動自動矯正環和自動補水裝置。

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『靈活的配置』

由于CSU - W1 SoRa 是基于 CSU - W1 產品上的升級,可兼容單相機或雙相機模式。通過安裝其他設備也可以調整為多相機模式。使用尼康 Ti2-E 倒置顯微鏡平臺,可以通過 LAPP 照明器為系統添加各種其他需要的成像和光刺激設備, 如 TIRF,光刺激模塊 DMD 以及其他光刺激掃描設備。

參考文獻

T. Azuma and T. Kei, "Super-resolution spinning-disk confocal microscopy using optical photonreassignment". Opt. Express 23, 15003-15011 (2015).



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