細胞培養中,細胞間交叉污染并不罕見,多是由于在培養中操作時各種細胞同時進行,混雜使用器皿和液體所致,這種污染能使細胞的生長特性、形態特征等發生變化,有些變化較輕、不易察覺,有些可能由于污染的細胞具有生長優勢最終壓過原來細胞而導致細胞的生長抑制,最終死亡。常用觀察細胞形態學、分析生長特性和核型、檢測細胞的標記物等方法檢測交叉污染的細胞。
操作規范條例:
1、操作時,試劑不用盡量及時蓋上蓋子,每開一個試劑要用酒精燈消毒。
2、從培養箱取放細胞前,用酒精清潔雙手,盡量縮短開門時間和減少開門次數。
3、培養瓶放入培養箱前,用酒精消毒表面,并稍等至酒精揮發后再放入,以免培養箱內滯留過多乙醇蒸氣。
4、使用移液槍時,將容器傾斜以便于移液,切勿將槍桿碰觸瓶口及內壁。一旦發生倒吸情況,要及時用酒精棉球擦拭,以免液體殘留導致細菌滋生。
5、先取試劑、耗材,再取移液槍、裝槍頭。很多人習慣先an裝槍頭,然后去拿試劑、耗材,殊不知無意間槍頭已經觸碰其他地方導致污染。
6、凍存細胞時凍存管蓋子需擰緊,復蘇細胞時,從液氮罐取出凍存管,輕擰蓋子,以確認蓋子是否擰緊。鑷子夾住凍存管蓋子與管體交界處,在37度水浴鍋中快速解凍,水面不可超過凍存管蓋沿,不建議直接扔進水中,以免水滲入造成污染。
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