操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
商品屬性:
產品名稱 | |
規格 | 100管/96樣 |
檢測方法 | 微量法 |
貨號 | GOY-01S6800 |
商品介紹:
測定意義
Cr6+主要來自電鍍、冶煉、表面處理工業等排放的污水和廢氣。通過消化道、呼吸道、皮膚及粘膜Cr6+進入人體,造成傷害,甚至引起遺傳變異而致癌。
測定原理:
在酸性環境中,Cr6+與二苯碳酰二肼作用生成紫紅色絡合物,在540nm有特征光吸收。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、15ml試管,可調式移液槍、濃硫酸、丙酮和純水。
實驗方法學:
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
5’-二鳥苷二鈉 90%3,4-二羥基苯甲 分析標準品,≥99%Anti-LILRB3/CD85a/PirB/FITC 熒光素標記白球蛋白樣受體-B抗體IgG
β-半乳糖苷 偶聯級丹皮酚 99%Anti-LIR-8/CD85c/LILRB5/FITC 熒光素標記白球蛋白樣受體8抗體IgG
葡萄糖氧化 >100 U/mg丹皮酚 分析標準品Anti-LIS1/FITC 熒光素標記無腦回的致病基因LIS1抗體IgG
葡萄糖氧化 150-180U/mg大麥芽堿 分析標準品,≥99%Anti-Livin /FITC 熒光素標記一種新的凋亡抑制蛋白抗體IgG
葡萄糖氧化 100U/mg苯酞 99%Anti-LIX1/FITC 熒光素標記LIX1抗體IgG
異胍 用于分子生物學, ≥99%鹽酸水蘇堿 分析標準品Anti-LKB1/FITC 熒光素標記一種抑癌基因IgG
異胍 ≥99%鹽酸水蘇堿 98%Anti-phosphor-LKB1(Ser334)/FITC 熒光素標記化/蛋白激抗體IgG
D-葡萄糖-6-二鈉鹽 98%噻吩-2,5-二羧酸 98%Anti-phosphor-LKB1(Ser428) /FITC 熒光素標記化/蛋白激抗體IgG
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