細胞轉染：
1. UMNSAH/DF-1雞胚胎成纖維細胞轉染試劑的準備
① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。
② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。
2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質體體積：DNA 質量)來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體積的無血清培養基。加入合適質量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉染試劑，再次震蕩。
公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！
名稱 | UMNSAH/DF-1 (雞胚成纖維細胞) |
別稱 | UMNSAH-DF-1; UMNSAH-DF 1; UMNSAH-DF1; UMNSAH/DF#1; DF-1; DF1; Douglas Foster-1 |
種屬 | 雞 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
生長培養基 | DMEM＋10% FBS＋1% P/S |
凍存條件 | 凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮 |
培養條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：39℃（Max.40℃，Min.38℃） |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
注意事項 | 1、該細胞培養難度較高，溫度波動會導致細胞空泡增多； 2、該細胞為38℃~40℃培養，最佳培養溫度為39℃，37℃培養會影響細胞狀態，建議提前準備專用培養箱； 3、受溫度波動影響，收貨常見細胞空泡較多，穩定培養后可恢復。 |
背景描述 | UMNSAH/DF-1細胞是起源于10日齡的ELL-0雞蛋的雞細胞株，自發永生化。分離原代雞胚成纖維細胞并在培養液中培養，傳代直到衰老；在衰老過程中離心以保持細胞培養在30%到60%滿；不衰老的克隆進行鑒定并傳代不少于30次。在軟瓊脂上沒有觀察到克隆增殖，說明UMNSAH/DF-1細胞是永生化而沒有轉化。UMNSAH/DF-1細胞可作為病毒增殖、重組蛋白表達和重組病毒生產的基質。 |
年齡（性別） | 10日齡 |
組織來源 | 胚胎，自發永生化 |
細胞類型 | 自發永生化細胞 |
生物安全等級 | 1 |
倍增時間 | ~22-36 hours |
致瘤性 | No, in immunosuppressed mice.No, in semisolid medium. |
保藏機構 | ATCC; CRL-12203 |
細胞傳代：
1. 試驗準備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養皿，離心管。
2. 棄掉培養皿中的培養基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。
3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養瓶壁，觀察到細胞從壁上脫落下來為止。
4. 加入 1ml 的含血清培養基終止反應。
5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細胞分散開。
6. 將培養液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。
7. 用培養液重懸細胞，細胞計數后選擇 0.8X106 個細胞加入一個 35mm 培養皿。
8. 將合適體積培養液加入離心管中，混勻細胞后輕輕加入培養皿中，使其均勻分布。
9. 將培養皿轉入 CO2培養箱中培養，第二天轉染。
細胞培養實驗基本操作：
①進無菌室前要洗手，按規定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內的培養液成分如蛋白質等燒焦后會產生有害物質，吸管再用時會將其帶到培養液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產生有毒氣體，危害培養細胞，同時塑料細胞培養用品也會產生變形影響使用。
③使用培養液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養液應保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養液應立即封閉瓶口，培養的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養液、細胞懸液時，應專管專用，一旦發現吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去，以防止污染擴大或造成培養物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發現原有的細胞遺傳物發生改變，可以復蘇早期凍存的細胞使用。
著絲粒蛋白H封閉多肽 | 貓支原體PCR檢測試劑盒 |
豬流感病毒（H1型）PCR試劑盒 | 睪丸受體4ELISA試劑盒 |
人低密度脂蛋白受體相關蛋白5(LRP-5)ELISA檢測試劑盒 | 肝配蛋白B1ELISA試劑盒 |
人神經保護因子(CVNPF) ELISA檢測試劑盒 | IgA-Fc斷片受體ELISA試劑盒 |
小鼠白介su11(IL-11)試劑盒ELISA | 甘油激meiELISA試劑盒 |
人8異前列腺suF2α(8-iso-PGF2a)檢測試劑盒elisa | 真核翻譯起始因子4A2ELISA試劑盒 |
分泌型卷曲相關蛋白1封閉多肽 | 腸球菌通用PCR試劑盒 |
血管內皮生長因子A封閉多肽 | 馬媾疫錐蟲PCR試劑盒 |
EGFR擴增和過度表達蛋白封閉多肽 | 鴨瘟病毒PCR試劑盒 |
載脂蛋白L4封閉多肽 | 中華鱉虹彩病毒（STIV）核suan檢測試劑盒 |
eIF4ENIF1蛋白封閉多肽 | /新城疫病毒(AIV/NDV)核suan檢測試劑盒 |
細胞粘附分子1封閉多肽 | UMNSAH/DF-1雞胚胎成纖維細胞馬流感病毒亞型PCR檢測試劑盒 |
WDFY3蛋白封閉多肽 | 馬克洛菌PCR試劑盒 |
大腦富含鳥苷suan激mei相關蛋白封閉多肽 | 禽傳染性支氣管炎病毒Conn型RT-PCR試劑盒 |
細胞質膜微囊蛋白-3封閉多肽 | 禽傳染性支氣管炎病毒型PCR檢測試劑盒 |
