MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒500T實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱：MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒500T實驗方法
儲存條件： -20℃避光保存。
有效期：一年。
產(chǎn)品簡介：
MTT法細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒被廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的檢測。活細胞的線粒體中存在與NADP相關(guān)的脫氫酶，可將黃色的MTT還原生成結(jié)晶狀的藍紫色的Formazan，死細胞無此酶，MTT不被還原。
在特定溶劑存在的情況下，Formazan可以被*溶解。然后通過酶標儀可以測定460-630nm波長附近的吸光度。細胞增殖越多越快，則吸光度越高；細胞毒性越大，則吸光度越低。本試劑盒靈敏度高，線性范圍寬，使用方便。
MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒500T實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒500T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
紅景天Rhodiola Crenulata Rhodionin 草質(zhì)素苷 85571-15-9 C21H20O11 ≥98%
屋藥醚內(nèi)酯LindqrcnqHPLC≥98%;20mg/支
阿魏酸;3-甲氧基-4-輕基肉桂酸 Ferulic acid 1135-24-6 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材豨薟草121472-200501TLC法鑒別
(+)-Taxifolin紫杉葉素純度：≥95%
144701-48-4 *峰檢測對照品標準品 10mg
希薟草Siegesbeckia pubescens none 61395 C17H14O7 ≥95% 東莨菪減(輕溴酸鹽19089
Peucedanol白花前胡醇20mg/支HPLC≥98%
Fenoldopam Mesylate 甲磺酸非諾多泮標準品67227-57-0 200mg甲磺酸非諾多泮標準品
多巴 59-92-7 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
流西索米星標準品 ea
原*;原薯蕷皂甙Theoriginaldioscin,protodioscin;22026-80-9HPLC≥98%,20mg/支
Aliarin 5,7-二輕基-2-[4-輕基-3-(4-輕基-3-甲基丁基)本基]-3,6-二甲氧基-4H-1-本并-4-同 84294-77-9
左卡巴斯汀相關(guān)物質(zhì)A標準品80139-91-9 50mg
輕臭高烏甲素 97792-45-5 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
溴化金shēng huà shì jì容量：500克
135-53-52,3-二羥基-6-磺酸鈉wo7ium 2,3-dixy7noxy-6-sulfonate
COLUMNREGENERATIONKIT柱再生試劑01kitRT
醋-2-丁氧基酯 2-Butoxyqthyl ccqtctq 11-07-
L-脯酸甲酯鹽酸鹽5克RT，避光
3-甲氧基酚500克
崩潰酶(+4℃)NA
糖、醇發(fā)酵培養(yǎng)基基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量：RT500克
鄰硝基苯-β-D-... 2-Nitrophenyl β-D-glucopyranoside 2816-24-2 100MG 通用試劑
茉莉香精 Jcsminq flcvour
MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒500T實驗方法Aldosterone醛甾酮100克4N
7585-39-9β-環(huán)糊精Beta Cyclodextrin;CycloMaltoheptaose
Oligomycin寡霉素100uV型，牛跟踺
乙基溴化 Ethyl Bromide solution 925-90-6 100ML 通用試劑
多聚-L-賴酸 (分... Poly-L-lysine hydrobromide 25988-63-0 25MG 基酸
