人腎系膜細胞提取物【Human Kidney : Normal Renal Mesangial Cell Derivatives】 人腎系膜細胞提取物是從人腎系膜細胞提取的，人腎系膜細胞從正常人腎組織制備。正常人腎組織采集自各地方醫院，采集工作根據IRB 和HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

潛在的應用： <1>已知基因的PCR克?。?/span><2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質組學；<6>芯片研究與表達圖譜。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。

收到凍存細胞的處理方法：
1.37°C水浴預熱培養基；
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續暖細胞）；
3.在超凈臺中加入5ml培養基重懸細胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養基重懸細胞后轉入T25培養瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養箱中培養(培養瓶蓋沒有透氣孔的話，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。

實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造，并經過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
1168091-68-6  GDC-0623  10mM(in1mLDMSO)  Camel Pox Virus(CPV駱駝痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 

1168091-68-6  GDC-0623  25mg  Volepox Virus田鼠痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 

1168091-68-6  GDC-0623  5mg  Camel Pox Virus(CPV駱駝痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 

1168-42-9  Scutellarein tetramethyl ether  1mg  Rocio Virus羅西奧病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 

116861-26-8  Fmoc-D-Ser-OH  25g  Ross River Virus(RRV)羅斯河病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
CDC37 Others Mouse 小鼠 CDC37 / CDC37A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) α-煙酰胺腺嘌呤二核苷1酸,縮減二鈉鹽α-Nicotinamide adenine dinucleotide, reduced di salt質量規格：美國進口

腎小球內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)β-NADP-二醛β-NADP-dialdehyde質量規格：美國進口

草魚肝臟細胞;L8824 視網膜母細胞瘤，WERI-Rb-1細胞 KB(口腔表皮樣癌細胞)9-苯基蒽(>98.0%(GC))9-Phenylanthracene質量規格：>98.0%(GC)

腦瘤細胞;SF767N-苯基-9-蒽胺(>98.0%(GC))N-Phenyl-9-anthramine質量規格：>98.0%(GC)

REG1B Others Human  REG1B / PSPS2 細胞裂解液 (陽性對照)  1-萘(>98.0%(GC))1-Iodonaphthalene質量規格：>98.0%(GC)
人腎系膜細胞提取物說明SLIK4 Others Human  SLIK4 / Slik4 細胞裂解液 (陽性對照) ?；秦i去氧膽酸鈉質量規格：≥98%,美國進口 taurohyodeoxycholate hydrate

Calu-3 肺腺癌細胞(胸膜滲出液)磺丁基-β-環糊精;磺丁基倍他環糊精鈉質量規格：>99%,USPCaptisol( beta-Cyclodextrin, sulfobutyl ethers,  salts)

BGC-823-EGFP-puro胃癌細胞 Human gasic cancer cells BGC-823-EGFP-puro 1640+10% Hyclone滅活血清+2ug/ml puromycin纈氨霉素質量規格：>95% (HPLC),進分Valinomycin

BMP2 Protein Human 重組 BMP-2 蛋白 (Fc 標簽)5-氯-1，3-二甲基吡唑 質量規格：>98%，5-Chloro-1,3-dimethyl-1H-pyrazole

心臟微血管內皮細胞 (HCMEC)( 5×105 ) SF9, 昆蟲卵巢細胞 其它甘氨鵝脫氧膽酸鈉質量規格：>97%,BRGlycochenodeoxycholic Acid  Salt
注意事項：
1.接收到細胞，肉眼觀察細胞培養基顏色
，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。