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產品名稱 | GV3101(pJlC SA-rep)電擊感受態細胞 50ul*50 |
包裝 | 50ul*50 |
分類 | 根癌農桿菌感受態細胞 |
培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質粒或連接產物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養至少15小時。
AFA/snoRNP/U3RNP 人抗核仁纖維蛋白抗體 規格: 48T/96T
ANA 人抗核仁抗體 規格: 48T/96T
gp210 人抗核膜糖蛋白210抗體 規格: 48T/96T
ANA 人抗核抗體 規格: 48T/96T
ASA 人抗骨骼肌抗體 規格: 48T/96T
anti-tox IgM 人抗弓形體IgM抗體 規格: 48T/96T
anti-tox IgG 人抗弓形體IgG抗體 規格: 48T/96T
AGAA 人抗高爾基體抗體 規格: 48T/96T
LMA 人抗肝細胞膜抗體 規格: 48T/96T
GV3101(pJlC SA-rep)電擊感受態細胞 50ul*50 LC1 人抗肝細胞胞質1型抗體 規格: 48T/96T
LSP 人抗肝特異性脂蛋白抗體 規格: 48T/96T
LSP 人抗肝特異性脂蛋白抗體 規格: 48T/96T
LKM 人抗肝腎微粒體抗體 規格: 48T/96T
CAM-ab 人抗鈣調素特異抗體 規格: 48T/96T
AT-DⅣ 人抗鈣蛋白酶抑素抗體 規格: 48T/96T
anti-PIV IgM 人抗副流感病毒IgM抗體 規格: 48T/96T
anti-RV IgG 人抗風疹病毒IgG抗體 規格: 48T/96T
ABM-Ab 人抗肺泡基底膜抗體 規格: 48T/96T
MSA 人抗紡錘體抗體 規格: 48T/96T
PM-Scl/PM-1 人抗多發性肌炎硬皮病抗體 規格: 48T/96T
anti-HDV 人抗丁型肝炎病毒抗體 規格: 48T/96T
PR3 Ab-IgG 人抗蛋白酶3抗體IgG 規格: 48T/96T
ssDNA 人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體 規格: 48T/96T
AMA 人抗單核細胞抗體 規格: 48T/96T
TRAb 人抗促甲狀腺素受體抗體 規格:
shēng huà shì jì 次亞磷酸鈣 容量: RT 100克
shēng huà shì jì 次* 容量: 10克
shēng huà shì jì 次氯酸鈉 容量: 500克
shēng huà shì jì 次氯酸鈣 容量: RT 5克
shēng huà shì jì 酸銨 容量: RT 500克
shēng huà shì jì 次甲基綠 容量: 100克
shēng huà shì jì 次鉍 容量: RT 25克
shēng huà shì jì 純水 容量: RT 25克
shēng huà shì jì 蟲膠 容量: 1公斤
shēng huà shì jì 赤蘚糖醇 容量: 100克
shēng huà shì jì 赤霉素GA4+7 容量: RT 5克
shēng huà shì jì 赤霉素GA3 容量: 500克
shēng huà shì jì 橙黃IV 容量: 2~8°C 100克
shēng huà shì jì 橙黃G6 容量: 1公斤
shēng huà shì jì 橙黃Ⅱ 容量: 2~8°C 250克
shēng huà shì jì 橙黃Ⅰ 容量: 2~8°C 250克
shēng huà shì jì 成套緩沖劑 容量: 保存:-20℃ 50次/300ul/支
shēng huà shì jì 稱量紙 容量: 100毫克
shēng huà shì jì 潮霉素B 容量: RT 25克
48T/96T
注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態細胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態細胞為例。
2.待感受態細胞融化后,向感受態細胞懸液中加入目的DNA(根據實際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養45分鐘使菌體復蘇
5.根據實驗需求,取適量已轉化的感受態細胞,加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養,37℃培養12-16小時。
GV3101(pJlC SA-rep)電擊感受態細胞 50ul*50 |