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GV3101(pSoup) 感受態細胞 100ul*10-生命科學儀器

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  • 所在地上海市
  • 更新時間2019-09-24
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GV3101(pSoup) 感受態細胞 100ul*10運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
GV3101(pSoup) 感受態細胞 100ul*10-生命科學儀器 產品詳情

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產品名稱GV3101(pSoup) 感受態細胞 100ul*10
包裝100ul*10
分類根癌農桿菌感受態細胞

培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質粒或連接產物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養至少15小時。

人卵清蛋白特異性IgE 規格: 48T/96T

人卵巢癌標志物CA125ELISA Kit,48T/96T 人卵巢癌標志物CA125ELISA Kit,48T/96T 規格: 48T/96T

 PEA 人綠膿桿菌外毒素A 規格: 48T/96T

 TrxR 人硫氧還蛋白還原酶 規格: 48T/96T

 Trx 人硫氧化還原蛋白 規格: 48T/96T

 MS 人硫酸褪黑色素 規格: 48T/96T

 KS 人硫酸角質素 規格: 48T/96T

 HSPG 人硫酸肝素糖蛋白 規格: 48T/96T

 JE IgG 人流行性乙型腦炎抗體IgG 規格: 48T/96T

 EP 人流行性腮腺炎 規格: 48T/96T

 FLU 人流感病毒抗體IgG 規格: 48T/96T

 FLU A 人流感病毒A 規格: 48T/96T

GV3101(pSoup) 感受態細胞 100ul*10 SCCAg 人鱗狀細胞癌相關抗原 規格: 48T/96T

 SCCAg-2 人鱗狀上皮細胞癌抗原2 規格: 48T/96T

 PIPLC 人磷酯酰肌醇特異性磷酯酶C 規格: 48T/96T

 PLCγ1 人磷酯酶Cγ鏈 規格: 48T/96T

 PLC 人磷酯酶C 規格: 48T/96T

 PI Ab-IgG/IgM 人磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM 規格: 48T/96T

 GPC-3 人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 規格: 48T/96T

 PL-A2 人磷脂酶A2 規格: 48T/96T

 PCK 人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 規格: 48T/96T

 PGM 人磷酸葡萄糖變位酶 規格: 48T/96T

 PI3K 人磷酸肌醇3激酶 規格: 48T/96

shēng huà shì jì 硅粒 容量: RT 5克

shēng huà shì jì 硅膠板HF254 容量: 保存-20℃ 25U

shēng huà shì jì 硅膠板H 容量: 2~8℃ 500毫克

shēng huà shì jì 硅膠板GF254 容量: 保存:-20℃ 10毫克

shēng huà shì jì 硅膠板GF 容量: 保存:-20℃ 10KU

shēng huà shì jì 硅膠板G 容量: 保存:-20℃ 150U

shēng huà shì jì 硅膠HF254 容量: 100毫克

shēng huà shì jì 硅膠H 容量: 10KU

shēng huà shì jì 硅膠GF254 容量: 1克

shēng huà shì jì 硅膠G 容量: 保存:-20℃ 1克

shēng huà shì jì 硅膠60熒光薄層層析鋁箔板 容量: 25毫克

shēng huà shì jì 硅膠60熒光薄層層析玻璃板 容量: 保存-20℃ 5KU

shēng huà shì jì 硅膠60H 容量: 2~8℃ 25毫克

shēng huà shì jì 硅膠60G 容量: 100毫克

shēng huà shì jì 硅膠60 薄層層析玻璃板 容量: 保存-20℃ 5KU

shēng huà shì jì 硅膠 容量: 5KU

shēng huà shì jì 硅(晶塊) 容量: 100克

shēng huà shì jì 光神霉素 容量: RT 5克

shēng huà shì jì 寡霉素 容量: 1公斤

shēng huà shì jì 寡聚脫氧胸苷纖維素 容量: 10克

shēng huà shì jì 固紫醬GBC鹽 容量: 250ku

shēng huà shì jì 固體改良馬丁瓊脂培養基 容量: 40克

T

注意事項:

1. 產品僅用于科研感受態細胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態細胞為例。
2.待感受態細胞融化后,向感受態細胞懸液中加入目的DNA(根據實際情況加入適量的DNA,通常100        μl感受態細胞能夠被1         ng超螺旋質粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養45分鐘使菌體復蘇
 5.根據實驗需求,取適量已轉化的感受態細胞,加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養,37℃培養12-16小時。

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