20S蛋白酶體抑制劑(Epoxomicin)正在熱銷的產品：NIS(Na+/I-symporter;NIS) 鈉轉運體蛋白（多肽抗原）明膠 CP
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產品介紹:
Epoxomicin(BU-4061T)是從放線菌中分離出的抗腫瘤化合物，是20S蛋白酶體的選擇不可逆抑制劑。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ 號：134381-21-8 別名：BU-4061T 純度：99.89% 分子量：554.72 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
英文名稱：Epoxomicin
產品規格：1mL(10mM)|100ug|1mg|5mg|10mg|20mg
貨號：FS-X10618
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
冬蟲夏草PE-Cy3標記的兔抗小鼠IgMAnti-SLC18A1 Antibody核基質蛋白4(NMP4)
耐熱鹽土生古菌PE-CY5標記的兔抗小鼠IgMAnti-SLC16A4 Antibody核黃轉運蛋白2(RFT2)
明尼蘇達被毛孢Alexa Fluor 555標記的兔抗小鼠IgMAnti-SLC18A3 Antibody核還原M1(RRM1)
枯草芽孢桿菌堿性磷（AP）標記的兔抗小鼠IgMAnti-SLC19A1 Antibody核磷化(NP)
大腸埃希氏菌堿性磷（AP）標記的羊抗小鼠IgMAnti-SLC1A1 Antibody和肽(CPP)
球孢白僵菌辣根過氧化物標記的兔抗豬IgGAnti-SLC1A1 Antibody合子阻滯基因1(ZAR1)
臺中金黃桿菌膠體金標記的兔抗豬IgGAnti-SLC1A2 Antibody汗αL(IDUα)
豌豆根瘤菌（都不提供）PE標記的兔抗豬IgGAnti-SLC1A1 Antibody含硬化蛋白域蛋白1(SOSTDC1)
圓褐固氮菌PE-CY5標記的兔抗豬IgGAnti-SLC1A3 Antibody含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)
大腸埃希氏桿菌PE-Cy7標記的兔抗豬IgGAnti-SLC1A3 Antibody含血管性血友病因子A域蛋白2(vWA2)
噬組節桿菌生物標記的兔抗豬IgGAnti-SLC1A3 Antibody含血管性血友病因子A域蛋白1(vWA1)
變幻青霉生物標記的兔抗大鼠IgGAnti-SLC1A4 Antibody含溴區PHD指蛋白1(BRPF1)
鶴羽田戴爾福特菌辣根過氧化物標記的小鼠抗兔IgMAnti-SLC1A3 Antibody含鋅飄帶域蛋白1(ZNRD1)
戊糖片球菌PE-Cy7標記的小鼠抗兔IgGAnti-SLC1A6 Antibody含纈酪肽蛋白(VCP)
孟氏假單胞菌Alexa Fluor 555標記的小鼠抗兔IgGAnti-SLC22A1 Antibody含鈀蛋白(PALLD)
淺絳紅鏈霉菌Alexa Fluor 647標記的小鼠抗兔IgGAnti-SLC22A3 Antibody含卵巢癌免疫反應抗原域蛋白2(OCIAD2)
神經束蛋白186抗體純黃絲衣霉大鼠胃粘膜上皮細胞提取物
膜相關磷脂轉運蛋白抗體紅冬孢酵母大鼠淋巴血管內皮細胞提取物
活化T細胞核因子5蛋白抗體大核青霉大鼠腦動脈血管內皮細胞提取物
神經激肽B抗體橘灰青霉大鼠淋巴內皮細胞提取物
20S蛋白酶體抑制劑(Epoxomicin)木層孔 氧化釕腦脊髓炎
木賊鐮孢 三氧化二鎳乙型肝炎病表面抗原
核盤 氮化硅流感病
糞肥纖維單胞 氮化硅睪酮
三葉草葉桿 氮化鉭雌
多主葡萄殼 鈦鎂腎上腺
庫爾薩諾夫鏈霉 氧化镥去甲腎上腺
胃竇乳桿 鈮鋰孕酮
根霉 二氧化銥血清促性腺
孔雀石（綠）鏈霉 硫化銦(III)抗HCG抗體
亞膜威克漢姆酵母 硅鎢，二十六水雄性
釘斑鏈霉 氧化鎵生長
釀酒酵母 碲化鎵(II)糖皮質
薄層桿 納鍶鐵氧體鹽皮質
大腸埃希氏 六氟鋯甘膽抗體
