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產品介紹:
茜素紅S染色試劑中的茜素紅S可通過與鈣離子和其他金屬離子發生鰲和反應而形成可以在顯微鏡下直接觀察的帶顏色的復合物。本產品就是基于此原理而開發。 產品特點： 1．即開即用，用戶不需要單獨準備各種溶液。 2．操作簡捷，性能穩定，顯色清晰。 3．可用于組織切片中的鈣沉積，尤其適用于骨細胞或組織的病理和生理研究。 4．可用于檢測動物原生代或培養細胞的鈣沉積。 5．本產品為通用型，不但用于鈣離子的檢測，還可用于FeCl2和CdCl2的檢測。 儲存條件：常溫運輸和保存，有效期一年。 |
中文名稱：茜素紅S染色試劑盒
英文名稱：Alizarin Red S Staining Kit
產品規格：100mL
貨號：FS-X9758
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
血小板反應蛋白(THBS1)英文名：THBS1 色CYP3A抗體包裝25g
血栓調節蛋白(TM)英文名：TM 色cP450 CYP20A1抗體包裝5g
血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)英文名：SAA2 色cP4501B1抗體包裝1g
血清淀粉樣P物質(SAP)英文名：SAP 色cP450 CYP26A1抗體包裝5g
血紅氧合2(HO2)英文名：HO2 磷化周期E抗體包裝100mg
血紅氧合1(HO1)英文名：HO1 磷化周期E2抗體包裝5g
血紅蛋白(HB)英文名：HB 周期M3抗體包裝1g
血管抑(ANG)英文名：ANG 周期Y/X抗體包裝250mg
血管性血友病因子(vWF)英文名：vWF 磷化周期D3抗體包裝1g
血管細胞粘附分子1(VCAM1)英文名：VCAM1 色b5還原3抗體包裝1g
血管生成樣蛋白7(ANGPTL7)英文名：ANGPTL7 CWC22蛋白抗體包裝250mg
血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)英文名：ANGPTL3 9號染色體開放閱讀框95抗體包裝5g
血管生成樣蛋白2(ANGPTL2)英文名：ANGPTL2 19號染色體開放閱讀框67抗體包裝10MG
血管生成樣蛋白1(ANGPTL1)英文名：ANGPTL1 磷化酪蛋白激1γ1+γ2+γ3抗體包裝100ml
血管生成4(ANGPT4)英文名：ANGPT4 原卟啉氧化3抗體包裝25ml
ADP核糖基化因子結合蛋白抗體泛交叉反應蛋白(UCRP)N/A
茜素紅S染色試劑盒細鏈格孢 檸檬二鈉鹽絲裂原活化蛋白激4
暗擬莖點霉（可訂購） 檸檬哌水合物絲裂原激活的蛋白激;MAP激
產卟啉桿 9,9'-螺二芴斯鈣1
產黑鏈霉 2-溴-4,5-二氟斯鈣2
針葉樹散斑殼 4-咪唑死亡受體3
球孢白僵 3,4-二氟死亡受體5
葡萄座腔 4,5-二咪唑四氫生物蝶呤
稻生黃單胞 4,4-二氟鹽鹽松弛H2
球孢白僵 (1R,2S)-1-叔丁氧羰基氨基-2-乙烯基環烷甲松弛肽;松弛
強壯根瘤 2-溴-6-氟吡啶性成纖維生長因子
雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇) 3-吡啶基偕肟性成纖維生長因子1
日本色鹽桿 2--1-嗎琳乙-1-酮髓過氧化物
運動節桿 乙酰乙乙酯鈉鹽髓過氧化物特異性抗中性粒胞質
腐皮鐮孢 三(2,4-戊二酮)銦(III)髓鞘堿性蛋白
新鞘氨 4-氨基-2--5-甲基嘧啶髓鞘堿性蛋白抗體
