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產品介紹:
用途： 抗酸菌(諾卡菌和紅球菌等)染色，可鑒別抗酸菌與非抗酸菌 注意事項： 抗酸菌或弱酸菌(諾卡菌和紅球菌等)呈紅色，非抗酸桿菌和背景呈淺藍色。主要由復紅液、脫色液組成。 儲存條件：室溫，避光，12個月 |
中文名稱：抗酸染色液(改良Kinyoun冷染法)
英文名稱：
產品規格：3×50ml|3×100ml
貨號：FS-X10119
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
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谷棒桿菌ENAH蛋白抗體Human ICA1(Islet cell autoantigen 1) 人20S蛋白體(20SP)免疫試劑盒
天山中慢生根瘤菌Mesorhizobium│tianshanense 質量規格：Standard for GC,≥99%(HPLC)楊
砂單胞菌Arenimonas│oryziterrae 質量規格：分析標準品,≥99.5%(HPLC)對羥基丁酯
: HBUM77348資源名稱: 鏈霉菌 質量規格：用于HPLC衍生化,≥99.0% (HPLC)對羥基酯
抗酸染色液(改良Kinyoun冷染法)*松乳菇 1-(4-基)-3-甲基-5-吡唑啉酮環磷鳥
烏飯樹擬莖點霉 2,5-二溴己二二乙酯NADH還原
豇豆慢生根瘤 4-溴鄰苯二甲酐色C還原
阪崎腸桿 亞磷二甲酯布魯東氏酪激
淡黃曲霉 5-吡啶-2-羧銅鋅超氧化物歧化
黑曲霉 DL-2-甲基丁甲酯L-天冬氧化
裂孔平伏 2-特戊酰氨基-6-皮考啉交替氧化
菊苣假單胞 2-特戊酰基吡啶脫氫
釀酒酵母 1-萘基異酯V型ATP
煙芽孢桿 5-氟-2-異亞基氨基氧苯脫氧核糖核
枯草芽孢桿 溴二二甲酯透明質
釀酒酵母 鈉固氮
華根霉 3,5-二甲基-1-氫-吡咯-2-羧叔丁酯-4-羧乙酯條紋花葉病
黃傘（可訂購） 2-溴二苯并呋喃線條花葉病
畢赤酵母 3,4-二肼鹽鹽1.6二磷果糖
