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CD54 ICAM-1 (Intercellular dhesion molecul
產品介紹:
PYR-41是一種特異的，細胞可透過的E1抑制劑，IC50值<10μM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ 號：418805-02-4 純度：98.0% 分子量：371.3 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱：E1抑制劑(PYR-41)
英文名稱：PYR-41
產品規格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10613
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
PE-Cy3標記的兔抗羊IgMAnti-SEMA3E Antibody黑親和(MLPH)
平菇PE-CY5標記的兔抗羊IgMAnti-SENP1 Antibody黑皮質激5受體(MC5R)
藍微褐鏈霉菌辣根過氧化物標記的驢抗羊IgGAnti-SERPINA4 Antibody黑皮質激4受體(MC4R)
*杏葉斑鏈格孢辣根過氧化物標記的小鼠抗羊IgGAnti-SERPINA4 Antibody黑皮質激3受體(MC3R)
枯草芽孢桿菌羅丹明標記的羊抗大鼠IgGAnti-SERPINA3 Antibody黑瘤抑制性活性蛋白1(MIA1)
泡盛曲霉Cy7標記的驢抗豚鼠IgGAnti-SERPINA1 Antibody(PB0371)黑瘤黏附分子(MCAM)
中山氏芽孢乳桿菌中山氏亞種PE標記的驢抗豚鼠IgGAnti-SERPINA1 Antibody黑瘤缺乏因子2(AIM2)
嬰兒配方乳粉 低聚果糖PE-Cy3標記的驢抗豚鼠IgGAnti-SERPINA5 Antibody黑瘤缺乏因子1(AIM1)
膠孢Cy5標記的驢抗豚鼠IgGAnti-SERPINA6 Antibody黑色瘤優先表達抗原(PRAME)
釀酒酵母Alexa Fluor 350標記的驢抗豚鼠IgGAnti-SERPINB5 Antibody(PB0311)黑色瘤關聯硫軟骨蛋白聚糖(MCSP)
釀酒酵母Alexa Fluor 555標記的驢抗豚鼠IgGAnti-SERPINC1 Antibody黑色瘤關聯ME20(ME20M)
枯斑擬盤多毛孢Alexa Fluor 647標記的驢抗豚鼠IgGAnti-SERPINB2 Antibody(PB0372)黑色聚集激受體1(MCHR1)
木耳屬Cy5標記的驢抗羊IgGAnti-SERPINC1 Antibody黑色A(MLANA)
北京諾卡氏菌Alexa Fluor 350標記的驢抗羊IgGAnti-SERPINE1 Antibody赫曼斯基普德拉克綜合征蛋白6(HPS6)
根瘤菌膠體金標記的羊抗人IgMAnti-SERPINE1 Antibody核轉錄因子Y亞基γ(NFYC)
兩歧雙歧桿菌PE-Cy3標記的兔抗人分泌型IgAAnti-SERPINH1 Antibody核有絲分裂器蛋白1(NUMA1)
腦低密度脂蛋白受體蛋白1抗體Methylobacteriumaquaticum大鼠成骨細胞提取物
軸突生長誘向因子G2抗體Methylobacteriumtarhaniae大鼠腎小管上皮細胞提取物
軸突蛋白2抗體Methylobacteriumplatani大鼠膀胱平滑肌細胞提取物
軸突蛋白1Neurexin1α抗體Arthrobacterilicis大鼠腎上皮細胞提取物
E1抑制劑(PYR-41)根霉屬 鈷鋰梨漿蟲病抗體
金黃殼囊孢 D-環基CD63分子
三叉爪鬼筆 (1S,2S)-N,N'-二羥基-N,N'-雙(二苯基乙酰基)環己烷-1,2-二戊型肝炎病IgG抗體
鷹嘴豆中間根瘤 納鐵鎳戊型肝炎病IgM抗體
空腸彎曲桿 4-十二烷基苯磺血紅蛋白
珊瑚諾卡氏(珊瑚色諾卡氏，珊瑚紅諾卡氏，小原放線) 3-磺酰血管內皮生長因子
枯草芽孢桿 1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵低密度脂蛋白
短小芽孢桿 N-Boc-N-甲基乙二高密度脂蛋白
艾比湖嗜鹽堿紅 Di-μ-methoxobis(1,5-cyclooctadiene)dirhodium(I),98鈣蛋白抑制蛋白
枯草芽孢桿 甲氧基(環辛二烯)銥(I)二聚體組織蛋白B
釀酒酵母 (1,5-環辛二烯)二溴化鉑(II)組織蛋白L
指狀游動放線 二硫化鎢泰勒蟲
蘋果盤二孢* 氧化鉑(IV)一水合物焦蟲
鏈格孢 一氧化鈦傳染性支氣管炎
解淀粉芽孢桿 二硅化鉬傳染性動脈炎
