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英文名稱：Bardoxolone
產品規格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10615
產品介紹:
Bardoxolone是一種新型核調節因子(Nrf-2)激活劑。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ 號：218600-44-3 別名：CDDO;RTA 401 純度：99.21% 分子量：491.66 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
大腸埃希氏菌FITC標記的羊抗人IgMAnti-SFTPD Antibody核糖體蛋白L6(RPL6)
豌豆根瘤菌FITC標記的羊抗人IgGAnti-SFTPB Antibody核糖體蛋白L23A(RPL23A)
光帽鱗傘膠體金標記的羊抗人IgGAnti-SFTPA1 Antibody核糖體蛋白L13A(RPL13A)
PX459 V2.0FITC標記的兔抗人IgGAnti-SFTPA1/2 Antibody(PB0433)核糖激(RBKS)
異常畢赤酵母辣根過氧化物標記的兔抗馬IgMAnti-SGCA Antibody核糖核抑制因子(RI)
玫瑰黃鞘單胞菌Alexa Fluor 488標記的羊抗人IgGAnti-SGK1 Antibody核糖核外切3(ERI3)
運動節桿菌Alexa Fluor 647標記的小鼠抗人IgGAnti-SGK1 Antibody核糖核外切2(ERI2)
大腸埃希氏菌PE標記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-SGK1 Antibody核糖核外切1(ERI1)
野土地桿菌辣根過氧化物標記兔抗人IgAAnti-SHANK3 Antibody核糖核T2(RNASET2)
魯酵母生物標記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-SHBG Antibody核糖核P(RNASEP)
棒桿菌屬生物標記的兔抗人IgGAnti-SHC1 Antibody核糖核L(RNASEL)
Bacillus aryabhattai生物標記的小鼠抗人IgGAnti-SHFM1 Antibody核糖核K(RNASEK)
釀酒酵母生物標記的兔抗人分泌型IgAAnti-SHH Antibody核糖核H(RNASEH)
埃及枝頂孢生物標記的羊抗人IgMAnti-SHC1 Antibody(PB0435)核糖核A9(RNASE9)
香草蘭根疾Alexa Fluor 488標記的驢抗人IgGAnti-SHMT1 Antibody核糖核A8(RNASE8)
黃桿菌PE-CY5標記的兔抗人IgGAnti-SHISA7 Antibody核糖核A7(RNASE7)
核纖層蛋白A識別因子抗體Bacillussubterraneus大鼠膀胱上皮細胞提取物
中性鞘磷脂2抗體Helcococcuskunzii大鼠腎小球內皮細胞提取物
核受體蛋白NR2E1抗體脫葉鏈霉菌大鼠心肌細胞提取物
N-乙基順丁烯二酰亞胺敏感融合蛋白抗體梭菌屬大鼠冠狀動脈內皮細胞提取物
Nrf-2激活劑(Bardoxolone)多形布勒擔子酵母 硅烷基 2,2-二氟-2-(氟磺酰)醋鹽媾疫錐蟲抗體
香菇(L988) 9-吖啶尼帕病抗體
地衣芽孢桿 2-氨基嘧啶-5-甲非酯化脂肪
盤長孢狀盤孢 5-降烯-2-羧馬心脂肪結合蛋白
蠟蚧 N-Boc-1-氨基環丁烷羧馬結合珠蛋白；觸珠蛋白
IBV M41 HAR/HI serum 陽性血清（荷蘭引進） 4,6-二甲基二苯并噻吩輔肌動蛋白α1
間型串珠鐮孢 納碳化鋯輔肌動蛋白α2
昆明鏈霉 碳化鎢轉錄激活因子-1
蘇云金芽孢桿蘇云金亞種 碳化鈦(粉末)轉錄激活因子-2
根瘤 碳化鉭磷脂酰肌蛋白聚糖1
唐菖蒲青霉 碳化鈮磷脂酰肌蛋白聚糖4
冷變紫薄層 碳化鉿絡絲蛋白
粉紅單端孢霉 堿式碳銅緊密連接蛋白
就地堆肥地芽孢桿 硒化鉍(III)組織因子
克魯維畢赤酵母克魯維變種 五氧化三鈦組織因子途徑抑制物
