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Caspase-9/FITC 熒光標記白介1-β轉化樣凋亡蛋白6抗體IgGDL-谷氨 98%
Phospho-Caspase-9 (Pry153) /FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠化白介1-β轉化樣凋亡蛋白6抗體IgGL-谷氨雙芐酯對苯磺鹽 98
中文名稱：鞭毛染色液(Leifson法)
英文名稱：
產品規格：3×50ml
貨號：FS-X10115
產品介紹:
用途： 鞭毛染色 注意事項： 又叫利夫森氏染色法，主要由鞣酸、堿性品紅等組成，染色后菌體和鞭毛呈紅色。 儲存條件：室溫，避光，12個月 |
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
灰黃青霉DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體Human MSC(Musculin) 人B受體相關蛋白31(BCAP31)免疫試劑盒
谷棒桿菌磷化絲裂原活化蛋白激1/2抗體Human CENPU (Centromere protein U) 人B生長因子(BCGF)免疫試劑盒
釀酒酵母上皮粘附分子抗體Human MKL2 (MKL/myocardin-like protein 2) 人B淋巴瘤因子6(Bcl6)免疫試劑盒
香菇屬酪蛋白激受體B2抗體Human MOAP1 (Modulator of apoptosis 1) 人B淋巴瘤-XL(Bcl-xl)免疫試劑盒
少孢酵母表皮生長因子抗體Human MAZ (Myc-associated zinc finger protein) 人B連接蛋白(BLNK)免疫試劑盒
*雞油菌都不能訂購表皮生長因子受體3抗體Human MOB2 (MOB kinase activator 2) 人B活化因子受體(BAFF-R)免疫試劑盒
突臍蠕孢菌酪蛋白激A4受體抗體Human MDGA1 (MAM domain-containing glycosylphosphatidylinositol anchor protein 1) 人B活化因子(BAFF)免疫試劑盒
雀黃鏈霉菌上皮鈣粘附分子抗體Human MPHOSPH10 (U3 small nucleolar ribonucleoprotein protein MPP10) 人Bκ 輕肽基因增強子核因子抑制因子ε(NFKBIE)免疫試劑盒
鏈格孢紅生成受體抗體Human PRX(Periaxin) 人B群鏈球菌多糖抗體(IgG)免疫試劑盒
克魯斯假絲酵母腦啡肽抗體Human MKX(Homeobox protein Mohawk) 人B-淋巴趨化因子1(BLC-1/CXCL13)免疫試劑盒
楊齒白木層孔菌EID2蛋白抗體Human MARCO (Macrophage receptor MARCO) 人B淋巴抗原(CD20)免疫試劑盒
大腸桿菌上皮粘附分子抗體Human MST1R(Macrophage-stimulating protein receptor) 人blca-4 免疫試劑盒
淡紫擬青霉紅膜相關蛋白ERMAP抗體Human M6PR (Cation-dependent mannose-6-phosphate receptor) 人blca-1 免疫試劑盒
菜豆間座殼腺樣癌特異性相關抗原EMC1抗體Human SEMG1(Semenogelin-1) 人Bcl-2樣蛋白1(BCL2L1)免疫試劑盒
擬粉紅鎖擲孢酵母腺樣癌特異性相關抗原EMC1抗體Human MAD1L1(Mitotic arrest deficient 1-like protein 1) 人B7-H4 免疫試劑盒
斯氏梭菌硫軟骨蛋白多糖3抗體Human M6PR (Cation-dependent mannose-6-phosphate receptor) 人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)免疫試劑盒
綠色木霉Trichoderma│viride 質量規格：100μg/ml,u=3%華蟾酥基
熒光假單胞菌生物型FPseudomonas│fluorescens biotype F 質量規格：分析標準品木蘭脂
多噬伯克霍爾德氏菌Burkholderia│multivorans 質量規格：分析標準品,≥99.5%(GC)異飛薊賓
鞭毛染色液(Leifson法)秀珍菇 2-氟苯頻呢酯香豆-3-羥化
黑曲霉 3--2-中性轉化
氣微 4'-羥基-3'-乙酮堿性磷
枯草芽孢桿 4,6-二-5-嘧啶羧甘油三酯
綠粘帚霉 反式-4-乙基環己基酮脫氫
*匍枝根霉 5-溴-1H-吡唑[3,4-B]吡啶乙脫氫
黃玫瑰色諾卡氏 2-氟-5-溴吡啶-3-甲蘋果合
冷海水黃桿 3-肼基鹽鹽脯氧化
洋蔥伯克霍爾德 2,6-二-3-基－4－甲基 吡啶氫ATP
扶桑本森頓酵母 2--3-氟苯甲纖維蛋白
粗糙脈孢 5--2-嘧啶合成
解脂亞羅酵母 3,5-二甲黃質脫氫
草菇 [羥基(4-苯丁基)氧膦基]乙芐酯酮脫氫
鹽水球形 3-溴-2-甲氧基苯甲蘋果脫氫
枯草芽孢桿 N,2-二甲基芐蘋果合
