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MTF-1 金屬反
中文名稱：嗜酸性粒細胞稀釋液(計數液)
英文名稱：
產品規格：100ml
貨號：FS-X9923
產品介紹:
用途： 用于嗜酸性粒細胞計數 注意事項： 由桃紅等組成。 儲存條件：4℃，6個月 |
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
腦膜炎奈瑟菌支鏈基轉2抗體Human GSG1L 小鼠層連蛋白/板層(LN)免疫試劑盒
金龜子綠僵菌BCL2相關蛋白A1抗體Human GSPT2 小鼠草膦乙酰轉移(PAT)免疫試劑盒
谷棒桿菌B淋巴瘤蛋白3抗體Human GPRIN3 小鼠不對稱二甲基精(ADMA)免疫試劑盒
釀酒酵母轉錄因子MYB相關蛋白B抗體Human GPS2 小鼠補體因子H(CFH)免疫試劑盒
腐生葡萄球菌腐生亞種防御β1/Defensin β1抗體Human GPSM2 小鼠補體片斷5a(C5a)免疫試劑盒
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橄欖鏈霉菌蛇巴曲抗體Human GPX5 小鼠補體蛋白4(C4)免疫試劑盒
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豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS34程序性死亡配體1抗體Human GRAMD1B 小鼠補體1抑制物抗體(C1INH)免疫試劑盒
乳微桿菌B7-H4抗體Human GRAMD4 小鼠波形蛋白(VIM)免疫試劑盒
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44958=JCM12462資源名稱: 氧化假諾卡氏菌 質量規格：純度(銅)：52.5~56.5%β葡萄糖試劑盒3,4,5-三氧基
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格：>99%,BRβ葡萄糖試劑盒3,4,5-三氧基酯
豬呼吸與繁殖障礙綜合征病毒Arterivirus│Porcine respiratory and reproductive syndrome virus 質量規格：(Cu):36.0~38.0%,Tech Gradeβ萘試劑盒楊酯
嗜酸性粒細胞稀釋液(計數液)冬蟲夏草 化鉻(III)混合譜系激域樣蛋白
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哈茨木霉 2-溴-6-高親和力球蛋白ε受體α亞基
藍綠小四孢 反式茴香腦硫對甲
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枯草芽孢桿 2-乙酰基-1-甲基吡咯膠質源性連接蛋白
短雙歧桿 和厚樸γ-分泌
西班牙糖絲 大豆元糖還原
匍枝根霉原變種 2-甲氨基嘧啶載脂運載蛋白-1
桂花地霉 2-異基硫雜蒽酮芳香二烷基磷
竹喙球 槐角腮腺炎病抗原
黃柄曲霉 2-萘磺酰蘭尼堿受體2
鮭色鎖擲酵母 醋成纖維生長因子受體3
Deinococcus 5-溴-2-氟-3-吡啶羧甲酯性磷
藤黃孢鏈霉 磷奧他韋酯D
