中文名稱:HDAC廣譜抑制劑(PCI-24781)
英文名稱:PCI-24781
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10746
產品介紹:
PCI-24781(Abexinostat;CRA024781)是一種新的HDAC廣譜抑制劑,主要靶向HDAC1的Ki值為7nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:783355-60-2 別名:CRA 024781;CRA 24781;Abexinostat 純度:97.94% 分子量:397.42 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
柱孢菌屬p27(抗原)Anti-GCHFR Antibody人肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)
Enterobacter sichuanensisP63 腫瘤抑制基因(抗原)Anti-GCLM Antibody人肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)
皺折裸胞殼護骨(多肽抗原)Anti-GCNT6 Antibody人幽門螺桿菌相關基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)
解淀粉芽孢桿菌骨保護蛋白配體(抗原)Anti-GDF15 Antibody人幽門螺桿菌相關基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)
蘇云金芽胞桿菌增生性瘢痕相關蛋白(抗原)Anti-GCNT7 Antibody人粘蛋白/粘液7(MUC7)
三葉草根瘤菌多腺二磷多聚抗原Anti-GDF1 Antibody人粘蛋白/粘液7(MUC7)
草假單胞菌內脂/內臟脂肪(人:N端多肽)、內臟脂肪、 又稱:前B克增強因子、內肥、腹脂Anti-GDF5 Antibody人轉谷酰2C多肽(TGM2)
灰色鏈霉菌內脂/內臟脂肪Anti-GDF3 Antibody人轉谷酰2C多肽(TGM2)
Streptomyces內脂/B克增強因子Anti-GDF6 Antibody人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)
蘋果黑腐皮殼菌色上皮源性因子(多肽抗原)Anti-GDF2 Antibody人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)
假單胞菌屬磷脂磷2C(抗原)Anti-GDF7 Antibody人Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽(ⅠCTP)
產凍膠菌腸道肽轉運蛋白(小肽轉運蛋白)多肽Anti-GDI1 Antibody人Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽(ⅠCTP)
出芽短梗霉一種腫瘤抑制基因抗原Anti-GFER Antibody人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)
墳墓節桿菌孕激誘導阻斷因子(抗原)Anti-GDI2 Antibody人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)
根瘤菌piwi 樣1蛋白(抗原)Anti-GFM2 Antibody人粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC)
枯草芽孢桿菌過氧化活化增生受體γ(抗原)Anti-GGA1 Antibody人粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC)
Saitohin蛋白抗體木霉屬人結腸癌細胞
線粒體琥珀脫氫D抗體蠟狀芽孢桿菌人回盲腸癌細胞
超氧化物歧化4抗體霍氏腸桿菌人慢性髓原白血病細胞
沉默調節相關蛋白6抗體大腸埃希氏菌人乳腺浸潤性導管癌旁皮膚細胞
HDAC廣譜抑制劑(PCI-24781)大斑凸臍蠕孢 S-芐基-L-半胱白介1受體拮抗劑
枯草芽孢桿枯草亞種 2--6-甲基煙乳清蛋白
葡萄座腔 內消旋-2,3-二巰基丁二結核病
短小芽孢桿 2-噻吩乙β2微球蛋白
菊池鏈格孢 1-(2-)β-乳球蛋白
鏈球(不定種) 2-溴噻唑環磷腺
大腸埃希氏桿 膽固油酯乳房鏈球
蠟樣芽孢桿 3,5-二苯腫瘤壞死因子γ
羅倫隱球酵母羅倫變種 3-溴-4-甲基噻吩β干擾
谷棒桿 N,N,N',N'',N''-五甲基二乙烯基三細粒棘球絳蟲抗體
癭青霉 3,4-二苯甲酰β內酰
釀酒酵母 哌-2-羧牛血清白蛋白
頂青霉 油酰神經元烯化
白靈側耳 3,5-二甲基異噁唑皮質酮;腎上腺酮
干酪乳桿 烯苯S100B蛋白