脈絡膜微血管內皮細胞公司正在出售的產品：Bacillus cereus selective supplement 蠟狀芽孢桿選擇添加劑 1.09875.0001MERCK默克
葡萄糖蛋白胨培養基 250(g)
賴氨酸鐵瓊脂（LIA） 250(g)
麥康凱瓊脂基礎 250(g)
K-F 鏈球瓊脂 (CM0701) Oxoid
沙保氏麥芽糖瓊脂 (CM0041a)
細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
公司細胞現貨供應，質量有保證、*、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產品名稱 | 脈絡膜微血管內皮細胞 |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 |
分類 | 原代細胞 |
貨號 | GOY-01X1106 |
商品介紹：
名稱 脈絡膜微血管內皮細胞 2.組織來源：脈絡膜組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 人脈絡膜微血管內皮細胞分離自眼球脈絡膜組織；脈絡膜在視網膜和鞏膜之間，含有豐富血管和色素細胞，對外力沖擊的耐受性較視網膜差，當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時，堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用，使脈絡膜在內外兩種作用夾攻下而發生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色，圍繞視神經乳頭部有照膜，為青綠色帶金屬光澤的三角形區。脈絡膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜，由纖維組織、小血管和毛細血管組成，軟而薄，棕紅色，在鞏膜和視網膜之間，續連于睫狀體后方。脈絡膜的血循環營養視網膜外層，其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養視網膜外層及玻璃體，并有遮光作用，使反射的物象清楚。同時對視覺系統起保護作用，對整個視覺神經有調節作用。續連于睫狀體后方，含豐富的血管和色素細胞，有營養和遮光作用。 5.方法簡介： ()實驗室分離的人脈絡膜微血管內皮細胞采用膠原酶-中性混合消化法結合密度梯度離心法、最后通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： ()實驗室分離的人脈絡膜微血管內皮細胞經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%） 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-H135 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態內皮細胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25% 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞*貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
培養操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
1瓶 LLC-MK2細胞株 LLC-MK2 低溫運輸和保存 0.312-20 ng/mL 人肽S-轉移A3（Glutathione S-transferase A3）ELISA試劑盒
平板計數瓊脂（PCA） Plate Count Agar 250g 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Beta-1, 4-galactosyltransferase 5
80KU DNA ，Ⅱ型 Deoxyribonuclease Ⅱ(Porcine Spleen) -20℃保存 78-5
脈絡膜微血管內皮細胞Rabbit Anti-chicken IgM/Bio 標記的兔抗雞IgM 規格: 0.1ml
KLHL36/C16orf44 Kelch樣蛋白36抗體 規格: 0.2mlC5 瘤易性候選基因5抗體 規格: 0.2ml
1瓶 Pt K1 (NBL-3)細胞株 Pt K1 (NBL-3) 低溫運輸和保存
50mL Potassium Chloride Solution（溶液）,1M Potassium Chloride Solution,1M 常溫保存
5KU β- 半乳糖苷 Galactosidase，Beta 4℃保存
1瓶 OCM-1A細胞株 OCM-1A 低溫運輸和保存
50T 屬PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
1 管 DB3.1大腸桿菌 DB3.1 E.coli Strain -80℃保存
2 ug pFA2-Elk1 pFA2-Elk1 低溫運輸，-20℃保存
膽汁液態培養基 Bile broth 250g
0.5 mg Wortmannin（PI3K抑制劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
2 ug pCMV5-Myc pCMV5-Myc 低溫運輸，-20℃保存
