原代小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細胞
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個半球都有三個面,即外側(cè)面(約占整個皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。少突膠質(zhì)細胞分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng),在銀浸染標本中,少突膠質(zhì)細胞比星狀膠質(zhì)細胞小,其突起也較小而少,呈珠狀,故被稱為少突膠質(zhì)細胞或寡突膠質(zhì)細胞。但是用特異性免疫細胞化學(xué)染色顯示的少突膠質(zhì)細胞,其突起并不少,而且還有許多分支。少突膠質(zhì)細胞的主要功能是在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中包繞軸突、形成絕緣的髓鞘結(jié)構(gòu)、協(xié)助生物電信號的跳躍式高效傳遞并維持和保護神經(jīng)元的正常功能。其異常不僅會導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘病變,還會引起神經(jīng)元損傷或精神類疾病,甚至可以引發(fā)腦腫瘤。根據(jù)少突膠質(zhì)細胞的分布和位置可分為三種:①束間少突膠質(zhì)細胞(interfasicular-oligodendrocyte),分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的白質(zhì)的神經(jīng)纖維束之間;②神經(jīng)細胞周少突膠質(zhì)細胞(perineuronal-oligodendrocyte),分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的灰質(zhì)區(qū),常位于神經(jīng)細胞周圍,與神經(jīng)細胞的關(guān)系密切,故又稱為神經(jīng)細胞周衛(wèi)星細胞(perineuronal-satellite-cell),但在神經(jīng)細胞胞體與此類細胞之間亦常有星形膠質(zhì)細胞的薄片狀突起分隔;③血管周少突膠質(zhì)細胞(pcrivascular-oligodendrocyte),主要分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的血管周圍。少突膠質(zhì)細胞形成的髓鞘膜是最為特化和復(fù)雜動物細胞膜之一,其上有眾多跨膜蛋白和表面蛋白用以維持髓鞘的致密穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。如半乳糖腦苷脂(GC),它是髓鞘的一種主要類脂,用GC抗體鑒別成熟的少突膠質(zhì)細胞是一種比較早的免疫鑒定方法。近十年來,神經(jīng)發(fā)育學(xué)科進展較快,更多的少突膠質(zhì)細胞分子標記物被鑒定出來,如PDGFRa、Mbp、CNP、SOX-10。 |
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)采用yi蛋白酶消化、混合細胞營養(yǎng)缺失培養(yǎng)、搖床振蕩結(jié)合差速貼壁法并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)經(jīng)GC(Galactocerebroside)免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
英文名稱 | Mouse Oligodendrocyte Cells | 組織來源 | 腦組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細胞形態(tài) | 梭形、多角形 |
生長特性 | 貼壁 | 貨號 | GOY-01X1243 |
1. 取材的組織要盡快培養(yǎng)。如若不能及時培養(yǎng),可將組織浸泡于培養(yǎng)液內(nèi),放置于冰浴或4℃冰箱中,如果組織塊很大,應(yīng)切成1cm3以下的小塊再低溫保存,但時間不能超過24h。
2. 從消化道、周圍有壞死組織等污染因素存在的區(qū)域取材,可用含500~1000u/ml的青BSS液漂洗5~10min,或用10%注射液沖洗浸泡10min再作培養(yǎng)。
3. 組織塊不易貼壁,可預(yù)先在瓶壁涂薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等。
4. 原代培養(yǎng)的1~2d內(nèi)要特別注意觀察是否有細菌、真菌、霉菌的污染,一旦發(fā)現(xiàn),要及時清除。
1. 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
2. 消化培養(yǎng)法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和 非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團塊膨松,由塊狀 變成 絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠 瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養(yǎng)后,細胞容易貼壁生長。
3. 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
4. 器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
抗人VEGF鼠源單克隆抗體雜交瘤細胞;VEGF-MmAb-C14C5 | 人肺轉(zhuǎn)化細胞;AE1201 |
小鼠雜交瘤細胞;HBHepama-18(HP-18) | 卡氏住白細胞原蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠雜交瘤細胞;HBHepama-1(HP-1) | 住白細胞原蟲屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒 |
人肺癌雜交細胞;2F7 | 豬圓環(huán)病毒3型染料法熒光定量PCR試劑盒 |
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人纖維肉瘤細胞系;JH-2 | 豬圓環(huán)病毒2型染料法熒光定量PCR試劑盒 |
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抗人fusion單抗雜交瘤細胞;1F4E6A2 | 豬圓環(huán)病毒通用染料法熒光定量PCR試劑盒 |
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