原代小鼠外周血單核細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品：Daudi-LUC-eGFP-puro人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞SK-BR-3/LUC (STR)人乳腺腺癌細(xì)胞CAMA-1人乳腺腺癌細(xì)胞MDA-MB-231-EGFP-LUC人三陰性乳腺癌綠色熒光蛋白-熒光酶標(biāo)記MO3.13
(STR)人少突膠質(zhì)細(xì)胞UPCI:SCC154人舌鱗癌細(xì)胞UPCI:SCC152人舌鱗癌細(xì)胞CAL-33人舌鱗癌細(xì)胞UPCISCC0
產(chǎn)品名稱 | 原代小鼠外周血單核細(xì)胞 | 英文名稱 | Mouse Peripheral Blood Monocyte Cells |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號 | GOY-01X1255 |
組織來源 | 外周血 | 細(xì)胞形態(tài) | 巨噬細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡介：
小鼠外周血單核分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。單核細(xì)胞起源于骨髓中的造血干細(xì)胞，并在骨髓中發(fā)育。當(dāng)它們從骨髓進(jìn)入血液時(shí)仍然是尚未成熟的細(xì)胞。與其他血細(xì)胞比較，單核細(xì)胞內(nèi)含有更多的非特異性脂酶，并且具有更強(qiáng)的吞噬作用。單核細(xì)胞在血液中停留2-3天后遷移到周圍組織中，細(xì)胞體積繼續(xù)增大，直徑可達(dá)50-80μm，細(xì)胞內(nèi)所含的溶酶體顆粒和線粒體的數(shù)目也增多，成為成熟的細(xì)胞。固定在組織中的單核細(xì)胞稱為組織巨噬細(xì)胞，它們經(jīng)常大量存在于淋巴結(jié)、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的單核細(xì)胞和組織巨噬細(xì)胞能生成并釋放多種細(xì)胞毒、干擾素和白細(xì)胞介素，參與機(jī)體防衛(wèi)機(jī)制，還產(chǎn)生一些能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞生長的因子。在炎癥周圍單核細(xì)胞能進(jìn)行細(xì)胞分裂，并包圍異物。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血單核經(jīng)CD14免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中，移入生物安全柜，
2) 從胸部解剖乳鼠，取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中，盡可能的除去結(jié)締組織等，
3) 取肺邊緣部分，剪碎，將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中，倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中，
4) 2h后，培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基，小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱，確保組織塊不會飄起來，
5) 每3d換液2mL，待細(xì)胞從組織塊中爬出來后，隔2d換液，待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時(shí)，去除組織塊，將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。
人外周血淋巴細(xì)胞；CCRF-SD | 人皮膚T淋巴瘤細(xì)胞；Hut78 |
人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1 | 邊緣無漿體(無形體)染料法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠肝癌細(xì)胞；Hepa1-6[Hepa1-6] | 中央無漿體(無形體)染料法熒光定量PCR試劑盒 |
人惡性黑色瘤細(xì)胞；A375[A-375] | 中山病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞；RBL-1 | 無漿體(無形體)通用染料法熒光定量PCR試劑盒 |
人橫紋肌肉瘤細(xì)胞；A-204 | 饒氏無綠藻染料法熒光定量PCR試劑盒 |
人黑色瘤細(xì)胞；A875 | 魏氏無綠藻染料法熒光定量PCR試劑盒 |
人低分化肺腺癌細(xì)胞；GLC-82[GLC82] | 無綠藻通用染料法熒光定量PCR試劑盒 |
GFP標(biāo)記的小鼠子宮頸癌細(xì)胞；U14-GFP | 嗜吞噬細(xì)胞無漿體(無形體)染料法熒光定量PCR試劑盒 |
人肺鱗癌細(xì)胞；LTEP-S | 七星庫道蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠正常肝細(xì)胞；NCTC1469 | 乙型流感病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
貓腎細(xì)胞；CRFK | 乙型腦炎（乙腦）病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
人卵巢癌細(xì)胞；ES-2 | 原代小鼠外周血單核細(xì)胞弗氏檸檬酸桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒 |
人絨毛膜癌細(xì)胞；JEG-3 | 麥芽香肉桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒 |
新城疫病毒中強(qiáng)毒(NDV-W)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 異尖線蟲屬染料法熒光定量PCR試劑盒 |
1、您收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作：
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時(shí)或過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)，然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代：
1）細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）棄上清，沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）待細(xì)胞貼壁后，觀察培養(yǎng)結(jié)果，之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存：
1）細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，再加入培養(yǎng)液終止消化，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）用適當(dāng)量的凍存液（基礎(chǔ)培養(yǎng)基：FBS：DMSO=7:2:1）重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4）先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。
4、細(xì)胞復(fù)蘇：
1）從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中，滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞，然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中；
3）放置于37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）第二天，換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
