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豚鼠α1微球蛋白(α1M)ELISA試劑盒組成和操作流程

時間:2018/11/12閱讀:311
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豚鼠α1微球蛋白(α1M)ELISA試劑盒組成: 
(1)結合物及標本的稀釋液;
(2)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
(3)酶標記的抗原或抗體(結合物);
(4)酶的底物;
(5)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),ELISA試劑盒參考標準品和控制血清(定量測定中);
(6)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);

 

豚鼠α1微球蛋白(α1M)ELISA試劑盒操作流程: 
1. 豚鼠α1微球蛋白(α1M)ELISA試劑盒從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

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