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PCR檢測試劑盒實驗反應步驟2025/3/31
反應步驟：1、變性：利用高溫（93-98℃）使雙鏈DNA解螺旋，高溫使兩條DNA鏈間的氫鍵斷裂。在第一個循環(huán)之前，通常加熱時間較長以確保模板DNA全分離，僅以單鏈形式存在。該步驟時間1-2分鐘，接下來...
PCR反應中的變性步驟核心要點2025/3/24
PCR反應中的變性步驟是解離雙鏈DNA為單鏈的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，其作用機制及參數(shù)設置直接影響擴增效率。以下是核心要點：1.變性目的雙鏈解離：通過高溫（通常93-98℃）破壞雙鏈DNA的氫鍵，形成單鏈模板，便于...
ELISA實驗洗板兩種方法簡述2025/3/17
在做ELISA實驗時，洗板有兩種方法：手工法洗板和洗板機洗板。二者沒有本質(zhì)的差別,只要操作合乎要求,均能得到正確、可靠的結(jié)果。手工洗板是每次反應溫育后,將反應液吸出或甩干,然后在板孔中加滿洗液,放置2...
ELISA檢測試劑盒包被原理2025/3/11
ELISA檢測試劑盒檢測系統(tǒng)可以說是現(xiàn)在運用最多的檢測辦法，并且技術(shù)手段許多，關(guān)于花板，假陽性，全顯色，悉數(shù)顯色，顯色比空缺還低，這些都起到了至關(guān)重要的效果，必定要多留心，那么ELISA檢測系統(tǒng)安穩(wěn)，...
二抗選擇時需要考慮的因素2025/3/3
?二抗（secondaryantibody）?：直接與靶抗原連接的一抗結(jié)合，通常用于標記和檢測一抗。二抗可以是完整抗體或抗體片段，如IgG分子、Fab片段以及F(ab’)2片段。選擇二抗時需要考慮的因...
凍存細胞一般過程2025/2/24
凍存細胞：1、選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前1d換液。2、按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達5×10^7／ml左右密度，離心，去上清。3、加入配制好的凍存液（培養(yǎng)液6....
PCR反應上下游引物詮釋2025/2/17
引物（Primer）在聚合作用的起始時，可以刺激合成另一種大分子，并與反應物以共價鍵形式連接的序列。在核酸化學中，引物是一段短的單鏈RNA或DNA片段，可結(jié)合在核酸鏈上與之互補的區(qū)域，其功能是作為核苷...
小鼠源細胞培養(yǎng)基的條件有哪些？2025/2/10
小鼠源細胞培養(yǎng)基的條件：1、合適的細胞培養(yǎng)基合適的小鼠源細胞培養(yǎng)基是體外細胞生長增殖的重要的條件之一，培養(yǎng)基不僅提供細胞營養(yǎng)和促使細胞生長增殖的基礎物質(zhì)，而且還提供培養(yǎng)細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。2、優(yōu)...
有關(guān)ELISA試驗保存問題詳述2025/2/5
酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）因其操作簡單，靈敏度高，特異性好，經(jīng)濟安全等特點而在臨床上廣泛應用，但是由于其操作步驟復雜，一般包括試劑準備，樣本收集，加樣，溫育，洗滌，顯色，比色，結(jié)果判定等，其中任何...
原代細胞和傳代細胞培養(yǎng)之間的差異2025/1/20
一、定義方面：1、原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細胞進行的第1次培養(yǎng)，也叫初代培養(yǎng)。2、傳代培養(yǎng)是指需要將培養(yǎng)物分割成小的部分，重新接種到另外的培養(yǎng)器皿（瓶）內(nèi)，再進行培養(yǎng)的過程。對單層培養(yǎng)而言，80%...
小鼠細胞實驗分離和培養(yǎng)步驟2025/1/13
小鼠細胞實驗分離和培養(yǎng)步驟:1.小鼠頸椎脫臼處死后，剃除腹胸部的被毛，放入裝有75%酒精的燒杯中浸泡5min。2.取出小鼠，在無菌環(huán)境下打開胸腔，取出心臟組織，注入盛有無菌1×PBS的培養(yǎng)皿中，洗凈組...
PCR引物設計需要遵循原則2025/1/6
PCR引物設計需要遵循原則：1、引物的長度一般為15-30bp，常用的是18-27bp，但不應大于38，因為過長會導致其延伸溫度大于74℃，不適于TaqDNA聚合酶進行反應。2、引物序列在模板內(nèi)應當沒...
抗體特異性的選擇考慮方面2024/12/24
抗體（antibody，Ab）是機體在體內(nèi)存在的外來分子、微生物等抗原物質(zhì)刺激下，由B淋巴細胞或記憶細胞增殖分化成的漿細胞所產(chǎn)生的、可與相應抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白（immunoglobulin...
細胞產(chǎn)物包含什么？2024/12/17
細胞產(chǎn)物有：氨基酸、核苷酸、多糖、脂類、維生素、抗生素、毒素、激素、色素等。細胞產(chǎn)物分為初級代謝產(chǎn)物和次級代謝產(chǎn)物。初級代謝產(chǎn)物有氨基酸、核苷酸、多糖、脂類、維生素等。次級代謝產(chǎn)物有抗生素、毒素、激素...
ELISA各種不同類型的檢測方法2024/12/9
ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。這種測定方法中有3種必要的試劑：1.固相的抗原或抗體；2.酶標記的抗原或抗體；3.酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標本的性狀及檢測的具備條件，可設計出各種不同...
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